所谓衍生化,就是将用通常检测方法不能直接检测或检测灵敏度比较低的物质与某种试剂(即衍生化试剂)反应,使之生成易于检测的化合物。按衍生化的方法可以分为柱前衍生化和柱后衍生化两种。
柱前衍生化是指将被检测物转变成可检测的衍生物后,再通过色谱柱分离。这种衍生化可以是在线衍生化,即将被测物和衍生化试剂分别通过两个输液泵送到混合器中混合并使之立即反应完成,随之进入色谱柱;也町以先将被测物和衍生化试剂反应,再将衍生化产物作为样品进样;或者在流动相中加入衍生化试剂,进样后,让被测物与流动相直接发生衍生化反应。
柱后衍生化是指先将被测物分离,再将从色谱柱流出的溶液与反应试剂在线混合,生成可检测的衍生物,然后导入检测器。按生成衍生物的类型又可分为紫外一可见光衍生化、荧光衍生化、拉曼衍生化和电化学衍生化。
衍生化技术不仅使高效
液相色谱分析体系复杂化,而且需要消耗时间,增加分析成本,有的衍生化反应还需要控制严格的反应条件。因此,只有在找不到方便而灵敏的检测方法,或为了提高分离和检测的选择性时才考虑用衍生化技术。