主题:【咨询】近期要购买半制备高效液相色谱,请问要注意哪些技术参数?

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hongyestn
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本人所在的实验室想购买一台半制备型的高效液相色谱,主要用来分离酶和多糖,请问要注意哪些技术参数才能满足我的要求?谢谢
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richies
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分离酶有点困难吧?

酶是蛋白质,会有2个问题,一个是分子量过大,一般的HPLC的100A填料最大分子量也就到10KD,即使用300A也就到20-50KD

二,大部分的酶是怕有机溶剂的,在有机体系中,蛋白质会变性的

同理,多糖也是只能做点寡聚糖,太大分子量的多糖在HPLC上面也做不了

因此,建议LZ买中压色谱,用凝胶来做制备
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feng861024
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半制备色谱要分离酶之类的大蛋白,存在填料的问题,就像楼上所说的。

如果要分离大物质的话可以使用中压制备,或者使用没有填料的场流分离系统来分离。

前者的纯度要低一点可以在95%左右,后者的纯度可以在99%以上。
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hongyestn
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原文由 richies(richies) 发表:
分离酶有点困难吧?

酶是蛋白质,会有2个问题,一个是分子量过大,一般的HPLC的100A填料最大分子量也就到10KD,即使用300A也就到20-50KD

二,大部分的酶是怕有机溶剂的,在有机体系中,蛋白质会变性的

同理,多糖也是只能做点寡聚糖,太大分子量的多糖在HPLC上面也做不了

因此,建议LZ买中压色谱,用凝胶来做制备


谢谢你的建议,目前我们用分析HPLC纯化酶用到的是缓冲盐系统,酶失活率不会很大,但就是制备的量太小,所以想买个半制备型的高效液相,分离多糖分子量在1、2万左右,也不会很大吧
richies
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如果你们可以用HPLC来分离你所要的物质,那么就根据你们所需要的分离条件来选择制备色谱

主要是2个方面,一个是流量,一个是压力
xiaowang268
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richies
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原文由 xiaowang268(xiaowang268) 发表:
主要还是要先定个价格区间


参数都没,咋订价格区间

50ml的和500ml的价格区别大了

再说,是单泵还是双泵,要不要走梯度,做多少颗粒的柱子,压力多少
小虾米
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hongyestn
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最近看到waters purifer100好像还不错,有用过这款的吗?
richies
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原文由 hongyestn(hongyestn) 发表:
最近看到waters purifer100好像还不错,有用过这款的吗?


Purifer 100好像不是WATERS的吧?我印象中这个东西是GE AKTA的

不知道是不是我记错了
hongyestn
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对对对,是我记错了,ge akta purifer 100,有没有它的规格参数?我找不到
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