实战宝典 原创大赛 仪器问答 仪友会 总帖：8020384今日发帖：25 我的社区 签到
快速导航 采购仪器 提醒
生物显微镜
版主:
入住本版
专家:
居民列表

主题：【原创】FISH样本制备到发单过程

浏览0 回复1 电梯直达
zhbvssong
头像
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
发表于：2012/01/19 07:46:39 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊

FISH样本制备到发单过程

样本的制备

1. 1000转/分离心悬液5分钟，用1ml新的固定液重新悬浮细胞。4℃保存固定的样本30分钟以上，直至FISH检测前。若要长期保存，-20℃保存在固定液中
2.直接滴加细胞悬液至1-2片预冷的玻片上，

样本的老化

1. 将样本片子放入2×SSC 37℃1小时

2. 从70%乙醇中取出，依次放入85%、100%乙醇中重复以上步骤

样本DNA的变性

1.将湿润的杂交盒放入37℃孵箱内预热至37℃

2. 染色缸中加入变性溶液，73±1℃水浴30分钟以上。

3. 用镊子拿出片子立刻放入室温的70%乙醇洗液中

5. 从70%的乙醇中拿出片子，依次放入85%、100%乙醇中重复上述步骤

在加入探针溶液前将片子加热至45-50℃2分钟

探针的预备

1. 让探针加热至室温，降低探针的粘度，使用合适的移液管

2. 振荡混合。用微型离心机将内容物离心（1-3秒）至底部。轻轻振荡再次混匀

杂交

1. 用树胶封片：用5ml的注射器吸去树胶，在盖玻片的四周加上树胶

2. 将封好的片子放入37℃预热的杂交盒中，盖紧盖子，37℃孵育6-24小时

杂交后的冲洗

储存

在暗处-20℃保存杂交玻片。

FISH结果的观察

在荧光显微镜下观察时

选择最好的视野区，计数细胞核

选择样本分布稀疏的区域，避免视野下出现成团的细胞。只计数信号不连续的细胞。

计数扫描：

依据荧光信号的计数结果，结合染色体计数标准作出正确的诊断。
该帖子作者被版主 新窦加 15积分， 2经验，加分理由：原创分享
为您推荐
近期热榜
热门活动
专属顾问快速对接
获取验证码
立即提交
ying12
ying12
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2012/1/27 8:53:48 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
学习了 谢谢
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
猜你喜欢 最新推荐 热门推荐
头像
高级回复 发表评论
品牌合作伙伴
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁