主题:【已应助】普通液相配窄口径柱子合适吗?

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论坛版主招募|新窦
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普通液相HPLC,MS分析,一直以来都是用的4.6口径的柱子,尝试过好多次改用2.1的柱子,但做出来的要么谱图峰形很不好,要么灵敏度差了很多级,使用梯度的话分析平衡时间都得加长。窄口径的色谱柱就不适合用在普通液相上么
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tangtang
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新窦老师好。

可能需要把液相管路换成细一点的,流动池也要换成半微量的。
happy爱米粒
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有句话好像是这样说的,UPLC以小颗粒填料技术为基础,但是仅有小颗粒填料并不能构成UPLC系统
continuum
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原文由 木有才(xgy2005) 发表:
有句话好像是这样说的,UPLC以小颗粒填料技术为基础,但是仅有小颗粒填料并不能构成UPLC系统


不是这样说的

UPLC 的差异是耐压

所以当然小颗粒填料没办法达成 UPLC系统

光是小颗粒加上也要达到一般流速

这个压力就让一般 HPLC受不了

不然就是一般的 peek通路或是接头承受不了

一般 HPLC用2.1是可行的

不过就是要留意整套系统的 dead volume

换小管径管路

bypass不需要的额外管路 ...

而且理论上 同样注射量 2.1所得到讯号应该是比 4.6高的

不过要考虑梯度

如果真的怕麻烦

就用isocratic 看看
happy爱米粒
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netsking
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原文由 continuum(continuum) 发表:
原文由 木有才(xgy2005) 发表:
有句话好像是这样说的,UPLC以小颗粒填料技术为基础,但是仅有小颗粒填料并不能构成UPLC系统


不是这样说的

UPLC 的差异是耐压

所以当然小颗粒填料没办法达成 UPLC系统

光是小颗粒加上也要达到一般流速

这个压力就让一般 HPLC受不了

不然就是一般的 peek通路或是接头承受不了

一般 HPLC用2.1是可行的

不过就是要留意整套系统的 dead volume

换小管径管路

bypass不需要的额外管路 ...

而且理论上 同样注射量 2.1所得到讯号应该是比 4.6高的

不过要考虑梯度

如果真的怕麻烦

就用isocratic 看看

一般的HPLC是可用的, 主要是看是什么样的混合器, 如果是泵前混合就不行, 如果是泵后混合就可以. 象Shimadzu的二元泵后混合UFLC, 就可以用2.1的柱子, 没有一点问题. 而Waters 600四元泵前混合, 就不行.就象你说的是因为Dead Volume的缘故.
peterhello
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原文由 新窦(capinter) 发表:
普通液相HPLC,MS分析,一直以来都是用的4.6口径的柱子,尝试过好多次改用2.1的柱子,但做出来的要么谱图峰形很不好,要么灵敏度差了很多级,使用梯度的话分析平衡时间都得加长。窄口径的色谱柱就不适合用在普通液相上么

因为柱体积下降了,柱前死体积的影响会更大,所以尽量减少管路体积,流速最好能走到0.5ml/min
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