原文由 xiongbb(xiongbb) 发表:
原文由 sally0326(sally0326) 发表:
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首先粒径。粒径越小,装填的时候柱效越高,分离度会越好,但是并不是粒径越细越好,因为粒径越小抗污染能力会低,需要样品前处理过程越复杂,还是根据自己实验需要选择柱子就好。
再说孔径,一般是和样品分子量有关系,正常分子量大于2000,就要选择150a以上的柱子。
然后说键合,关于各个厂家的命名,一般会考虑基质,以硅胶为例,用的硅胶不同,命名就会不同。键合过程也会不同,以c18为例,有封尾和不封尾之分。选择色谱柱一般考虑,键合相,C含量,孔径,粒径,耐酸碱,是不是亲水,寿命,还有就是厂家和价格。尽量选择有键合能力的厂家,平行性会好一些。
想问下,如果孔径选的不合适会咋样?小了如何,大了又如何?是不是小了就下不来了,大了就不保留呢?
孔径小了,样品进入不到孔内,活性基团也就接触不到样品,样品会随着每个硅胶粒之间的缝隙流出,导致前沿或者不保留;
如果样品过大,也会导致色谱柱堵塞。
孔径太大会导致峰谱带变宽,分离度降低。不过影响不是特别明显。
这样说来,是不是可以简单理解为“宁大勿小”呢?特别是制备色谱而言,峰型已经不是关注重点,纯度才是重点