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主题：【求助】梯度洗脱柱平衡的一些疑问

浏览0 回复12 电梯直达
minus213
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发表于：2012/04/18 11:29:16 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
实验用到梯度洗脱，A：40mM磷酸盐缓冲溶液  B：乙腈：甲醇：水（45:45:10）

时间(min)

B(%)

0

0

1.9

0

18.1

57

18.6

100

22.3

100

23.2

0

26

0


请教大家：梯度之前的平衡，要用哪一相平衡柱子？还是要运行几个空白梯度进行平衡？
我用的是A相，直至压力和基线稳了才进行梯度分析，这样对吗？
关于梯度洗脱柱平衡的注意事项请大家多指教一下。
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zhaohua8011
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2012/4/18 12:25:56 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不需要，用开始的梯度比例平衡即可！
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minus213
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2012/4/18 14:24:00 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
能按照我的梯度说明白一点吗？
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有水有渝
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2012/4/18 14:49:51 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
B(%)  0来平衡，最好是先做一个空白梯度。

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jgslhq
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2012/4/19 9:29:45 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我看你的梯度很容易析盐啊。。。
18.1到18.6，用0.5min就将有机相比例调这么高，而且盐浓度也挺大。楼主还是用缓一点的梯度升上去
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rc-angman
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2012/4/26 15:57:54 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主的C18柱子是耐水相的吗？还是用的SCX柱子？纯缓冲盐流动相对C18柱子的话不怎么样吧

  梯度平衡柱子都是用初始比例平衡的。比如说你进完一个样品之后，最好要用初始比例的流动相平衡一段时间柱子。否则因为流动相未恢复到原始比例，极性和前一次有差别，致使流动相洗脱能力变化，所要的峰保留时间就会不同了
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juegen
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2012/8/11 9:39:31 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
梯度平衡柱子都是用初始比例平衡的。比如说你进完一个样品之后，最好要用初始比例的流动相平衡一段时间柱子。否则因为流动相未恢复到原始比例，极性和前一次有差别，致使流动相洗脱能力变化，所要的峰保留时间就会不同了
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lkyitao
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2012/8/16 21:14:05 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
梯度洗脱前走个空白梯度，平衡有初始浓度
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yuechunguang
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2015/1/20 16:56:16 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 lkyitao(lkyitao) 发表:

梯度洗脱前走个空白梯度，平衡有初始浓度


就是走一个空白样，是这样的吗？

梯度洗脱程序如何平衡柱子？
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hujiangtao
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2015/1/21 15:11:42 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
初始流动相多平衡一会儿
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夏天的雪
bingwang228
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2015/1/21 19:09:47 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 yuechunguang(yuechunguang) 发表:
原文由 lkyitao(lkyitao) 发表:

梯度洗脱前走个空白梯度，平衡有初始浓度


就是走一个空白样，是这样的吗？

梯度洗脱程序如何平衡柱子？
可以在梯度程序的最后部分将流动相比例回到初始流动相，例如本例中最后23.2min到26min就是在平衡色谱柱
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