黑色素的量决定皮肤的颜色,人体皮肤的颜色取决于黑色素的含量与分布。而黑色素细胞的结构功能和数量直接影响皮肤中黑色素的含量,也是产生黑色素的决定因素。在人体皮肤中.约有400万个黑色素细胞。黑色素的合成必须有三种基本物质。酪氨酸是制造黑色素的主要原料。酪氨酸酶是酪氨酸转变为黑色素的主要限制酶.酪氨酸在酪氨酸酶作用下产生黑色素。目前公认的黑色素合成途径是:酪氨酸----多巴酸----多巴醌----多巴色素(或二羟基吲哚酸)-----黑色素低聚体----黑色素。美白化妆品功效评价的主要方法:
1、细胞水平功效测定
(1) 测定培养细胞酪氨酸酶的活性
黑色素细胞中黑色素合成机制非常复杂。人们对黑色素合成调控的认识从酪氨酸酶单酶学说到多酶学说.再到多态性,至今没有定论。从文献来看,评价美白化妆品的功效,主要以检测施加美白化妆品有效成分后,是否抑制酪氨酸酶活性为主要手段。酪氨酸酶活性检测方法有放射性同位素法、免疫学法和生化酶学法,其中以生化酶学法较为简单成熟。目前常用的细胞是体外培养的小鼠或人的黑色素瘤细胞,由于黑素瘤细胞具有能够多次传代、生长快、培养条件相对较低等优点,成为筛选美白剂时的首选细胞。20世纪70年代初,Eisinger成功培养出正常黑色素瘤细胞,越来越多地采用人体正常黑色素细胞的体外培养技术。
(2)测定对细胞黑色素数量的影响
细胞试验法可避免动物试验中由于动物个体差别而引起的实验误差,使实验更具重复性。美白化学物功能评价的最重要检测指标,就是细胞中黑色素含量测定,到目前为止,一直采用分光光度法测定黑色素细胞中的黑色素含量,此方法经典稳定。
2.动物试验法
该方法采用黄棕色豚鼠,其皮肤黑素细胞和黑素小体的分布近似于人类,试验结果重复性好,较小鼠模型更宜用于研究化妆品的美白功能。