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主题：【求助】液相色谱梯度洗脱，基线出不正常峰

浏览0 回复7 电梯直达
刘阿驽
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发表于：2013/01/25 14:58:44 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
用新买的C4柱，不接预柱，不进样品，空扳阀，在走梯度的时候，10%乙腈（0.1%三氟乙酸）水走30分钟变到100%乙腈的时候不出峰，但是100%乙腈走10分钟变到10%乙腈水的时候居然出峰了。                                       
之前柱子只进过萘的甲醇液，三针多肽的样品，溶剂是二甲基亚砜。不知道是怎么回事?  该如何分析这个问题呢?
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2013/1/25 15:39:47 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
100%乙腈走10分钟变到10%乙腈水的时候出峰是梯度变化过快造成的。
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yzulcl
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2013/1/27 15:01:44 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
顶沙发。
个人觉得更直接的原因是压力的剧烈变化造成的。你可以试试，不接色谱柱（用两通代替），流动相也不改，开泵1分钟，停泵1分钟，……试试看，检测器基线也会有类似色谱峰形的波动。
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houjjun
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2013/1/27 18:05:57 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
上个图看看吧，直观些
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刘阿驽
v2679464
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2013/1/28 11:30:22 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊


不好意思，图有些歪了。纵坐标响应值均为120mAU,梯度都是一样的，前一张图是只接两通，后一张图是接的C4柱，均未接预柱。梯度是，10%乙腈水10分钟，10%乙腈水30分钟变到100%乙腈，100%乙腈走30分钟，100%乙腈10分钟变到10%乙腈水（出峰了）。这样的梯度走了很多次，每次的响应值都是100mAU左右，不管加不加三氟乙酸。请各位高手帮小妹具体分析一下。谢谢了
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武灵
zhonghuashendun
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2013/1/28 17:59:19 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这个时间跨度有点大哈。楼主的这个图有点考眼力哦。具体出峰的时间点在哪里？峰宽多少？
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suiniubei
suiniubei
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2013/1/28 23:19:19 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊

　　你改变得太快了，当然会出峰。这个峰是假的，是因为你流动相变化所致。
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刘阿驽
v2679464
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2013/1/29 8:51:33 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一共走了185分钟，因为想看看最高的那个峰（110mAU),是不是因为进样阀污染的原因，所以同样的梯度走了两个时间段，只扳一下阀（未进样）。从100%乙腈10分钟变到10%乙腈水（出峰了）太快了吗？流速0.8mL/min,4.6*150MM的柱子
。不然应该增长到多少时间呢？
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