实战宝典 原创大赛 仪器问答 仪友会 总帖：8111695今日发帖：58 我的社区 签到
快速导航 采购仪器 提醒
检测服务
版主:
入住本版
专家:
居民列表

主题：【分享】热点跟踪：奶粉中双氰胺的检测方法(UPLC-MS/MS法)

浏览0 回复20 电梯直达
官人|云飘飘
头像
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
发表于：2013/01/30 16:49:25 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
该帖子已被Jun Nan Li设置为精华； 奖励积分记录： Jun Nan Li(10分)
引言：欢迎广大第三方实验室参与到热门事件的交流与讨论中来，感谢广州金域检验对于本次热点事件活动的技术支持
广州金域检验中心：http://www.woyaoce.cn/companyinfo/T100879.html

一、实验原理
样品经水浸泡并混匀，加入乙腈沉淀蛋白，通过冷冻离心去除脂肪，取清液经过固相萃取SPE小柱净化，氮气浓缩至干，后用1.00mL 50%乙腈水溶液复溶，过滤膜上UPLC-MS/MS测定。采用电喷雾正离子电离(ESI+ )模式和多反应监控(MRM)扫描模式，外标法定量。该方法在5ng/ml～500ng /ml范围内线性关系良好，相关系数(r2)大于0.999。

二、仪器和试剂
超高效液相色谱串联质谱联用仪(UPLC-MS/MS)，涡旋振荡器，超声波清洗机，氮吹仪。双氰胺标准品，固相萃取SPE小柱，VenusilHILIC液相色谱柱，微孔滤膜，乙酸铵、甲酸、乙酸、乙腈为色谱纯，实验用水为超纯水。

三、实验方法
1.提取、净化称取2.5g试样于50ml具塞离心管中，准确加入5ml水浸泡溶解后，准确加入乙腈20ml，振荡混匀，超声10min，5500r/min冷冻离心5min，取5ml上清液过固相萃取SPE小柱净化，氮气浓缩至干，后用1.00mL 50%乙腈水溶液复溶，过0.22um滤膜上UPLC-MS/MS测定。

2.图文详解
①称取奶粉样品1.00g于50mL具塞离心管中，涡旋振荡混匀



②目标物提取和离心



③固相萃取净化



④氮吹浓缩



⑤溶解定容



⑥上机测定



3.仪器参数
3.1色谱条件：色谱柱：Agilent HILIC puls 3.5μm  2.1*100mm；流动相：A：2mmol/L乙酸铵（pH=4.0）
B：乙腈
A：B=10:90
进样量：2ul；柱温：30℃；流速：0.3 ml/min。
3.2质谱条件液相色谱串联质谱联用仪：Agilent UPLC 1290& QQQ 6460；离子源：电喷雾离子源；扫描方式：正离子扫描；
检测方式：多反应监测MRM；干燥气温度（GasTemp）325℃;干燥气流量（GasFlow）5mL/min，雾化器压力（Nebulizer）50psi，鞘流气温度（SheathGas Temp）400℃，鞘流气流量（Sheath Gas Flow）12mL/min，毛细管电压（Capillary）3500（+）V，MRM条件：双氰胺85.2>68.1（CE=19eV），85.2>43.0（CE=21eV）；4.实验结果

4.1线性关系和检出限准确称取双氰胺标准品50mg于50ml容量瓶中，加水溶液并稀释至刻度，作为标准贮备液；分别量取一定量的标准贮备液，用乙腈稀释，配置成浓度为5ng/ml，10ng/ml，20ng/ml，50ng/ml，100ng/ml和500ng/ml的标准溶液，按照上述液质方法，结果见下表1：

表1双氰胺线性方程和定量限（UPLC-MS/MS法）



4.2检测方法稳定性考察选用50.0ng/ml的标准溶液连续进样6针，计算其保留时间和峰面积的RSD值，结果见表2：

表2检测方法定性和定量稳定性考察考察（UPLC-MS/MS法）




4.3.准确度和精密度选取市售某品牌奶粉试样，进行添加回收实验，结果见表3。采用空白样品稀释法判断检测方法的基质效应影响。空白净化液稀释和乙腈稀释的标准溶液，双氰胺峰面积和相对丰度比无明显变化，故判断该方法无基质效应的影响。
表3    0.10mg/Kg添加回收实验结果

5 检出限
本方法仪器最低检测浓度5ng/mL，按照上述样品前处理计算，本方法检出限0.01mg/kg。未检出样品以＜0.01mg/kg报值。

“百家检坛”之乳品中双氰胺的检测：
http://www.woyaoce.cn/news/newsdetails.aspx?id=91350
该帖子作者被版主 yqfxy加 5积分， 2经验，加分理由：热点话题 感谢分享
为您推荐
近期热榜
热门活动
您可能想找: 液质联用(LC-MS) 询底价
选参数 看心得 找厂商 查方案
专属顾问快速对接
立即提交
相关阅读
¤昭¤辉¤
chejinshui
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2013/1/30 22:57:24 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
赞一个，响应速度真快啊！
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
怪侠一点红
bing_xuhong
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2013/1/31 8:58:47 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
以后这样的跟踪会越来越多，努力提供论坛技术讨论水平！
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
西南的小石头
v2681902
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2013/1/31 12:48:54 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
赞一个，响应速度真快啊！
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
君子
v2682012
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2013/1/31 16:11:14 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
图人突然突然突然图
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
pheui
pheui
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2013/1/31 16:13:04 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 官人|云飘飘(yunjob) 发表:

请问这是哪家做的解决方案？怎么里面又是Venisil的柱子，又是Agilent的柱子？
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
2013/1/31 17:10:39 Last edit by yunjob
怪侠一点红
bing_xuhong
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2013/1/31 16:44:32 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
广州金域提供的解决方案！
此实验室我们曾经走访过，欢迎将来大家有时间去参观指导！

http://www.woyaoce.cn/news/newsdetails.aspx?id=82307
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
abcde
xyzwz123
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2013/1/31 18:05:02 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
双氰胺保留时间为1.15min左右，几乎在死时间处出峰，结果怎么做得好？！
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
怪侠一点红
bing_xuhong
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2013/2/1 8:46:52 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 abcde(xyzwz123) 发表:

双氰胺保留时间为1.15min左右，几乎在死时间处出峰，结果怎么做得好？！


技术方面可以与该公司咨询与讨论

联系方式：http://www.woyaoce.cn/member/T100879/ServiceInfo.asp?id=488
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
dooby
dooby
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2013/2/1 9:02:18 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
说的很详细，不错
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
crj841103
crj841103
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2013/2/1 10:41:24 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
很好啊，学习了！
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
手机版： 热点跟踪：奶粉中双氰胺的检测方法(UPLC-MS/MS法)
猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐
头像
高级回复 发表评论
品牌合作伙伴
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁