主题:【求助】液相柱如何清洗?

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yzguo
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流动相含有磷酸盐,分析完成后怎样清洗,是用纯甲醇吗?
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液相色谱柱的保存

1.反相色谱柱每天实验后的保养:
使用缓冲液或含盐的流动相,实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟,洗掉色谱柱中的盐,再用甲醇冲洗30分钟。注意:不能用纯水冲洗柱子,应该在水中加入10%的甲醇,防止将填料冲塌陷。
2.长期保存色谱柱:
如色谱柱要长时间保存,必须存于合适的溶剂下。对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中,正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中,离子交换柱可以储存于水(含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞)中,并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。储存的温度最好是室温。

色谱柱的保存方法
A.几天之内的短期放置,应先用溶剂冲洗好色谱柱(如凝胶柱则用蒸馏水来冲洗) ,再把色谱柱的两头用密封螺丝密封好即可。
B.如果色谱柱长期不用,应使用色谱柱使用说明书中所指明的溶剂来充满色谱柱,再把色谱柱的两头用密封螺丝密封好即可。
C.色谱柱应贮存在4℃-室温下,如果放置于0℃以下的环境里,柱内就会结冰,这也将导致柱效的降低。
D.注意溶剂的PH值,一般硅胶基质的色谱柱控制在2~8范围内。

贴心提示:
①首先柱子必须清洗干净后才能贮存,柱子不能贮存在水或水性溶剂中,否则会引起微生物的滋生。
②如果您使用的流动相中含有盐,请首先用高比例水冲洗(3%-5%有机相,1ml/min流速,冲洗30至40分钟),然后再用纯乙腈冲洗30分钟
③一定要将色谱柱的两端封严, 以防止由于溶剂挥发而造成的柱填料干缩现象,引起柱子结构的几何学改变,这可导致柱效的严重降低。

不同的色谱柱,采用不同的流动相保存的,反相色谱柱,就直接用甲醇。正相色谱柱就用正已烷了,如手性手色谱柱,不同的型号,要根据柱子的要求进行存放的。

如果长时间不用的话,最好是找个容器,用甲醇或乙腈把色谱柱浸泡起来。
1,反相色谱柱一般都用纯乙腈饱和放置
2,正相色谱柱用正己烷饱和放置;
3,手性色谱柱一般用90HEX:10IPA,也有用90HEX:10EtOH的,针对柱子;
4,反相手性色谱柱用40ACN:60H2O饱和放置;

总之柱子要保存在溶剂中,不然柱子干了,基本就没什么用了!
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yzguo
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原文由 石头记忆(zzip203) 发表:
液相色谱柱的保存

1.反相色谱柱每天实验后的保养:
使用缓冲液或含盐的流动相,实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟,洗掉色谱柱中的盐,再用甲醇冲洗30分钟。注意:不能用纯水冲洗柱子,应该在水中加入10%的甲醇,防止将填料冲塌陷。
2.长期保存色谱柱:
如色谱柱要长时间保存,必须存于合适的溶剂下。对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中,正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中,离子交换柱可以储存于水(含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞)中,并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。储存的温度最好是室温。

色谱柱的保存方法
A.几天之内的短期放置,应先用溶剂冲洗好色谱柱(如凝胶柱则用蒸馏水来冲洗) ,再把色谱柱的两头用密封螺丝密封好即可。
B.如果色谱柱长期不用,应使用色谱柱使用说明书中所指明的溶剂来充满色谱柱,再把色谱柱的两头用密封螺丝密封好即可。
C.色谱柱应贮存在4℃-室温下,如果放置于0℃以下的环境里,柱内就会结冰,这也将导致柱效的降低。
D.注意溶剂的PH值,一般硅胶基质的色谱柱控制在2~8范围内。

贴心提示:
①首先柱子必须清洗干净后才能贮存,柱子不能贮存在水或水性溶剂中,否则会引起微生物的滋生。
②如果您使用的流动相中含有盐,请首先用高比例水冲洗(3%-5%有机相,1ml/min流速,冲洗30至40分钟),然后再用纯乙腈冲洗30分钟
③一定要将色谱柱的两端封严, 以防止由于溶剂挥发而造成的柱填料干缩现象,引起柱子结构的几何学改变,这可导致柱效的严重降低。

不同的色谱柱,采用不同的流动相保存的,反相色谱柱,就直接用甲醇。正相色谱柱就用正已烷了,如手性手色谱柱,不同的型号,要根据柱子的要求进行存放的。

如果长时间不用的话,最好是找个容器,用甲醇或乙腈把色谱柱浸泡起来。
1,反相色谱柱一般都用纯乙腈饱和放置
2,正相色谱柱用正己烷饱和放置;
3,手性色谱柱一般用90HEX:10IPA,也有用90HEX:10EtOH的,针对柱子;
4,反相手性色谱柱用40ACN:60H2O饱和放置;

总之柱子要保存在溶剂中,不然柱子干了,基本就没什么用了!


很详细,学习了,多谢!
trwei1982
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使用缓冲液或含盐的流动相,实验完成后是否可以用水冲洗?冲多久才不会导致填料塌陷?还是一定要用10%的甲醇/水冲洗?
三人行
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原文由 trwei1982(trwei1982) 发表:
使用缓冲液或含盐的流动相,实验完成后是否可以用水冲洗?冲多久才不会导致填料塌陷?还是一定要用10%的甲醇/水冲洗?


如果缓冲盐浓度较大,我一般先用纯水冲10分钟,再用10%的甲醇/水冲洗约30分钟,最后用甲醇冲30分钟。
zhx_fs_ln
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DeeperBlue
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原文由 yzguo(yzguo) 发表:
流动相含有磷酸盐,分析完成后怎样清洗,是用纯甲醇吗?

缓冲盐要用高比例水相洗。不能用纯甲醇,会盐析,堵柱的。
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gogo2007
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nixiaolong
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原文由 gogo2007(gogo2007) 发表:
C18不能用纯水冲吧[/quote 现在有的厂家柱子可以,这个和厂家咨询下
tangtang
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有的色谱柱不需清洗,直接用流动相保存,根据色谱柱说明书。
flyaway
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原文由 zhx_fs_ln(zhx_fs_ln) 发表:
C18柱子最好不用纯水,不低于5%的有机相


看说明书,询问生产厂家。不一定有这么绝对。
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