主题：【分享】瘦肉精检测

近年来，瘦肉精的非法滥用已得到有效控制，莱克多巴胺作为瘦肉精的替代品，滥用趋势明显上升。在莱克多巴胺的检测中，常常会遇到这样的现象：用ELISA检测阳性的样品，用色谱法确证时却都为阴性，而且检测结果大相径庭。不同ELISA试剂盒的检测结果也相差很大。为什么会出现这样的情况呢？以下抛砖引玉，欢迎大家讨论。

1.莱克多巴胺的快速代谢特性
莱克多巴胺在动物体内不能稳定存在，会快速代谢，国外资料表明，在停药三天后，动物体内的莱克多巴胺原药残留量将很低，而以代谢物的形式存在动物体内。莱克多巴胺的代谢物主要有三种：莱克多巴胺葡萄糖甘酸A、莱克多巴胺葡萄糖甘酸B、莱克多巴胺葡萄糖甘酸C，而三种代谢物的比例是不确定的。
举例说明，如果给一头猪喂添加莱克多巴胺的饲料，在停药第0天尿样中的莱克多巴胺残留浓度为20ppb，第3天后，莱克多巴胺残留浓度将<1ppb，而莱克多巴胺葡萄糖甘酸A + 莱克多巴胺葡萄糖甘酸B + 莱克多巴胺葡萄糖甘酸C的浓度将>19ppb。

2.莱克多巴胺的正确检测方法
根据上述，要准确检测莱克多巴胺的残留量有两个选择：
A：除检测莱克多巴胺外，增加对莱克多巴胺代谢物的检测。
B：在检测前，用酶解的方法将莱克多巴胺代谢物还原成莱克多巴胺原药，再检测莱克多巴胺的含量。但酶解需要16小时。
对ELISA试剂盒，选择A和B都是可能的，但选择A依赖于ELISA试剂盒的交叉反应特性。
对于色谱方法，由于主要代谢物有三种之多，选择B更可行和方便。

3.ELISA试剂盒交叉反应特性对检测的影响
不同莱克多巴胺ELISA试剂盒的交叉反应特性差别很大，目前市场上的试剂盒主要有以下三类：

A：对三种莱克多巴胺葡萄糖甘酸的反应率都很低，不能检测代谢物。如果使用这种试剂盒，必须先作酶解还原。

B：对某些莱克多巴胺葡萄糖甘酸的反应率很低，而对某些莱克多巴胺葡萄糖甘酸的反应率极高。例如：
药物 交叉反应率
莱克多巴胺 100%
莱克多巴胺葡萄糖甘酸A 1%
莱克多巴胺葡萄糖甘酸B 3%
莱克多巴胺葡萄糖甘酸C 380%
显然，用这样的试剂盒直接检测，将可能出现假阴性（当样品中莱克多巴胺葡萄糖甘酸C的含量比较低时），也可能导致极高的假阳性（当样品中莱克多巴胺葡萄糖甘酸C的含量不低时）。所以，也必须先作酶解还原。

C：对三种莱克多巴胺葡萄糖甘酸的反应率比较均衡，例如美国柏尔的试剂盒：
药物 交叉反应率
莱克多巴胺 100%
莱克多巴胺葡萄糖甘酸A 52%
莱克多巴胺葡萄糖甘酸B 48%
莱克多巴胺葡萄糖甘酸C 187%
用这样的试剂盒直接检测，合理选择阳性限，是不会出现假阴性的，当然，由于对莱克多巴胺葡萄糖甘酸C的反应率超过了100%，会出现一定的假阳性，可以通过检测者的经验，适当提高阳性限来将假阳性率降低到合理的程度。

4. 总结
最准确的莱克多巴胺检测是将样品酶解还原后再进行检测，但酶解过程需要16小时，不利于快速检测的要求。而采用美国柏尔这样交叉反应比较均匀的试剂盒，合理选择阳性限，就可以在筛选时省掉酶解的步骤，极大地加快检测进程，减少检测工作量和降低检测费用。