主题:【讨论】这里列举了几种氨基酸的分析方法,各位主要用哪种呢?

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zy178
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最近看了一些文献,发现做氨基酸的方法非常多,这里罗列几种,不知道各位主要用哪种?

由于大多数的氨基酸在紫外区没有吸收或只有微弱的吸收,为提高检测灵敏度和分离度,需要对氨基酸进行衍生化,这样才能被紫外或荧光检测器所检测。

另外氨基酸极性非常大,无法用反相分析,通过衍生化也可以变离子型化合物为非离子型,用反相方法分离。

1、  HPLC 柱前衍生

柱前衍生:邻苯二甲醛(OPA)衍生一级氨基酸、9-氯甲酸芴甲酯(FMOC)衍生二级氨基酸

色谱柱:AAA专用柱

检测器:DAD338nm OPA-氨基酸;262nm FMOC-氨基酸)



2、  HPLC柱前衍生

柱前衍生:异硫氰酸苯酯(PITC

色谱柱:AAA专用柱

检测器:UV 254nm



3、  HPLC柱前衍生

柱前衍生:2,4-二硝基氟苯(DNFB

色谱柱:AAA专用柱

检测器:UV 360nm



4、  HPLC柱前衍生

柱前衍生: 6氨基喹啉基N羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯(AQC

色谱柱:反相柱(C18

检测器:UV 248 nm



5、  HPLC 柱后衍生

柱后衍生:邻苯二甲醛(OPA)

色谱柱:AAA专用柱

检测器:荧光或紫外



6、  离子色谱法:

HPAEC-IPAD(高效阴离子交换分离-积分脉冲安培检测)



7、氨基酸分析仪

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原文由 dahua1981(dahua1981) 发表:
我一般都是柱前衍生


您用的哪种衍生剂?
zy178
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现在不是有种氨基酸分析仪吗?


有的实验室氨基酸项目做的少,没有必要配置氨基酸分析仪,多用HPLC的方法去做
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现在不是有种氨基酸分析仪吗?


有的实验室氨基酸项目做的少,没有必要配置氨基酸分析仪,多用HPLC的方法去做


氨基酸没分析过,之前用氨基酸合成多肽,也是用HPLC分析的。
ECHO007
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原文由 e-lab(e-lab) 发表:
氨基酸手性分析要用什么手性柱分析比较好?


regis有款手性柱 ChiroSil RCA(+) or SCA(-),是专门用来分离氨基酸手性化合物的
zy178
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原文由 千层峰(jxyan) 发表:
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原文由 千层峰(jxyan) 发表:
现在不是有种氨基酸分析仪吗?


有的实验室氨基酸项目做的少,没有必要配置氨基酸分析仪,多用HPLC的方法去做


氨基酸没分析过,之前用氨基酸合成多肽,也是用HPLC分析的。


多肽HPLC相对简单些,用C18、C8、C4这些反相柱比较多。
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