实战宝典 原创大赛 仪器问答 仪友会 总帖：8042405今日发帖：189 我的社区 签到
快速导航 采购仪器 提醒
分析化学
版主:
入住本版
专家:
居民列表

主题：【讨论】大鼠白介素8ELISA试剂盒夹心法实验

浏览0 回复1 电梯直达
hysw
头像
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
发表于：2013/11/18 11:21:28 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一、原理
采用两株识别不同表位的抗IL-8单克隆抗体，其中一株(4D7)作为包被抗体，以识别和结合待检标本中的IL-8,另一株作为酶标抗体，与结合于包被抗体的IL-8的另一个表位结合并催化底物显色。
二、试剂器材
1. 试剂盒提供包被抗体、酶标抗体、标准品，底物(ABTS)、96孔elisa板。
2. 包被缓冲液、PBS、底物缓冲液配制同常规ELISA法。
三、操作步骤：
1. 包被：pH9.5 碳酸盐缓液稀释4D7单克隆抗体粗提γ球蛋白至1μg/ml,加入96孔板,100μl/孔，放4℃,36小时。
2. 封闭：0.1%吐温PBS(Buffer A)冲洗96孔板三次，加3%BSA Buffer A(Buffer B)200μl/孔，放37℃,1小时。
3. 加待检样品：Buffer A 冲洗96孔板三次，加待检样品及Buffer B 稀释的标准品100μl/孔，放37℃,3小时。
4. 加酶标抗体：Buffer A冲洗96孔板五次,3%PEG Buffer A稀释酶标抗体至1∶800，加入96孔板，100μl/孔，放37℃,1小时。
5. 显色：Buffer A冲洗96孔板五次，pH5.4柠檬酸缓冲液溶解底物(ABTS),0.2mg/ml,加3%H2O2,2μl/ml，加入96孔板，100μ/孔，室温下或37℃显色。
四、注意事项：
1. 待检标本如为血清，应采用一次性容器，血液采集后尽快(6小时以内)分离血清。
2. 封闭液或抗体稀释液应新鲜配制或冻存。
为您推荐
近期热榜
热门活动
您可能想找: 气相色谱仪(GC) 询底价
选参数 看心得 找厂商 查方案
专属顾问快速对接
立即提交
可能感兴趣
平凡人
zhaoyt1979
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2013/11/19 18:55:39 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
操作还是比较复杂，没看到大鼠如何处理的。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
手机版： 大鼠白介素8ELISA试剂盒夹心法实验
猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐
头像
高级回复 发表评论
品牌合作伙伴
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁