原文由 lifesinger(lifesinger) 发表:原文由 浪淘沙隐(zhoujin83) 发表:
试问,加离子对试剂是为了什么,怎样才能实现离子对试剂的作用?以下说说我的理解,因为我用离子对做酸性物质少,不一定对,但楼主不妨参考一下。
对于碱性物质来说,因为保留很弱,即使提高了流动相的pH,也不一定能有多大的保留。这种情况下,就可能需要使用离子对试剂;并且,为了使离子对试剂发挥作用,一般将流动相pH调至酸性,为的就是使碱性物质全部电离,以便于离子对试剂中的带电基团结合,减小极性以增强保留。
对于酸性物质来说,需要使用离子对试剂的情况下,基本上化合物的pKa很小。在这种情况下,流动相pH可能需要近中性才好。所以,不知道楼主流动相的pH是多少,可否试试其他pH。
还有,楼主的流动相如果只添加了离子对试剂的话,是不合适的,最好还能加上其他缓冲盐,否则光离子对是没有缓冲能力的,很容易因为样品带有酸碱性影响流动相pH而使方法不耐用。
先检讨一下自己,虽然做液相好久,但对基础理论并没有仔细学习过。
我目前用的叶酸流动相体系,和我们检测盐酸吡哆醇、核黄素、烟酸和盐酸硫胺素的流动相是一
样的。PH是1.8,不含缓冲盐。
据我的大概了解,这个PH值应该是为了增加保留。另外因为产品中有含铁、锌离子,据说PH太高
会析出对柱子不利。
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试问,加离子对试剂是为了什么,怎样才能实现离子对试剂的作用?以下说说我的理解,因为我用离子对做酸性物质少,不一定对,但楼主不妨参考一下。
对于碱性物质来说,因为保留很弱,即使提高了流动相的pH,也不一定能有多大的保留。这种情况下,就可能需要使用离子对试剂;并且,为了使离子对试剂发挥作用,一般将流动相pH调至酸性,为的就是使碱性物质全部电离,以便于离子对试剂中的带电基团结合,减小极性以增强保留。
对于酸性物质来说,需要使用离子对试剂的情况下,基本上化合物的pKa很小。在这种情况下,流动相pH可能需要近中性才好。所以,不知道楼主流动相的pH是多少,可否试试其他pH。
还有,楼主的流动相如果只添加了离子对试剂的话,是不合适的,最好还能加上其他缓冲盐,否则光离子对是没有缓冲能力的,很容易因为样品带有酸碱性影响流动相pH而使方法不耐用。
先检讨一下自己,虽然做液相好久,但对基础理论并没有仔细学习过。
我目前用的叶酸流动相体系,和我们检测盐酸吡哆醇、核黄素、烟酸和盐酸硫胺素的流动相是一
样的。PH是1.8,不含缓冲盐。
据我的大概了解,这个PH值应该是为了增加保留。另外因为产品中有含铁、锌离子,据说PH太高
会析出对柱子不利。
叶酸这么老的品种,难道没有药典方法吗?
原文由 生活就这么美好(xiaowang268) 发表:原文由 浪淘沙隐(zhoujin83) 发表:
铁锌离子在高pH下析出,应该是形成了氢氧化铁、氢氧化锌吧。氢氧化铁麻烦点,氢氧化锌不用担心。但是就算加了缓冲盐,流动相的pH调到酸性,应该也不太会形成氢氧化铁,何况离子对试剂中难道没有碱离子吗?
至于pH,既然使用了离子对,为何不可以试试其他的,比如3.0,pH1.8没有缓冲盐在这个位置有缓冲能力的吧?
你还是很专业啊,呵呵
原文由 浪淘沙隐(zhoujin83) 发表:原文由 lifesinger(lifesinger) 发表:
顶上来继续讨论!
发现是和具体仪器有关,但没找到根本原因。
waters600自动进样和安捷伦1260自动进样都不正常,表现为不同标准曲线的峰面积不成线性。
但岛津LC20AD手工进样正常,请指点。
个人认为,您这个结论值得怀疑。如果是某一台仪器自动进样器不正常尚可理解,但是两台都不正常我认为不应该。一般来说,自动进样器比手动进样更精密。