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主题：【求助】关于流动相添加剂

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erge
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发表于：2014/06/19 22:00:44 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
感觉平时做时很少去关注流动相添加剂的作用，请教各位高手，流动相添加剂有没有什么规律可循啊？比如什么时候用磷酸二氢钠，什么时候用乙酸铵，什么时候用磷酸，还有什么时候加了磷酸二氢钠再调PH值等等，请各位高手指点一二，或者有没有什么文献之类的可以看看呢？
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2014/6/20 7:10:07 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
没见过相关文献，认为流动相缓冲能力越强的效果越好。
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e_liang369
v2821515
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2014/6/20 8:56:13 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
加缓冲盐的目的是使游离态化合物转变成结合态，一般是酸性加酸，碱性加碱
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浪淘沙隐
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2014/6/20 9:11:24 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
加流动相缓冲剂及调节pH的作用主要有3点，一是增强流动相的缓冲能力，避免体系受到样品酸碱性的干扰；二是优化峰形，使色谱峰更加尖锐对称；三是抑制某些物质的解离或与体系的某种作用，使其只表现为一个色谱峰。第二点和第三点可能是同时发生的。
具体该怎么选择缓冲剂，我们的做法是：在起始开发方法时，并不考虑这点，首先就选择某个缓冲剂，配制某个pH的流动相，然后分析样品，如果保留、峰形及分离度不好，就改变条件，比如更换流动相的pH，查看趋势，然后选择最合适的方法参数。这时候，就有可能需要关注一下缓冲剂了。比如，你的流动相pH要求是4.0，那么你不会去考虑磷酸盐，因为磷酸盐在这里没有缓冲能力；又比如，你的方法波长为210nm，那么你就不太会去考虑醋酸盐或甲酸盐，因为这些会严重干扰基线。
该帖子作者被版主 bingwang228加 2积分， 2经验，加分理由：应助
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bingwang228
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2014/6/20 11:18:47 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
看标准，查文献，再此基础上进行尝试，选择合适的流动相
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老多_小多
emoc98311
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2014/6/20 16:10:26 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我认为主要还是围绕一个PKa值，只是理论学的不够，所以很多时候都是靠实验尝试
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houjjun
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2014/6/21 23:18:30 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这个和样品、色谱柱等有关系
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erge
lihouquan
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2014/6/23 22:55:20 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 三人行(jncxyy2012) 发表:

没见过相关文献，认为流动相缓冲能力越强的效果越好。


为什么呢？哪些缓冲能力强啊？
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erge
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2014/6/23 22:58:24 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 老多_小多(emoc98311) 发表:

我认为主要还是围绕一个PKa值，只是理论学的不够，所以很多时候都是靠实验尝试


恩，这个个人认为有很大关系，只是不太清楚怎么去研究
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erge
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2014/6/23 23:00:03 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 浪淘沙隐(zhoujin83) 发表:
加流动相缓冲剂及调节pH的作用主要有3点，一是增强流动相的缓冲能力，避免体系受到样品酸碱性的干扰；二是优化峰形，使色谱峰更加尖锐对称；三是抑制某些物质的解离或与体系的某种作用，使其只表现为一个色谱峰。第二点和第三点可能是同时发生的。

具体该怎么选择缓冲剂，我们的做法是：在起始开发方法时，并不考虑这点，首先就选择某个缓冲剂，配制某个pH的流动相，然后分析样品，如果保留、峰形及分离度不好，就改变条件，比如更换流动相的pH，查看趋势，然后选择最合适的方法参数。这时候，就有可能需要关注一下缓冲剂了。比如，你的流动相pH要求是4.0，那么你不会去考虑磷酸盐，因为磷酸盐在这里没有缓冲能力；又比如，你的方法波长为210nm，那么你就不太会去考虑醋酸盐或甲酸盐，因为这些会严重干扰基线。


那像氨基酸这种，是不是要用到缓冲能力很强的添加剂呢？
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浪淘沙隐
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2014/6/24 21:05:37 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 erge(lihouquan) 发表:
原文由 浪淘沙隐(zhoujin83) 发表:
加流动相缓冲剂及调节pH的作用主要有3点，一是增强流动相的缓冲能力，避免体系受到样品酸碱性的干扰；二是优化峰形，使色谱峰更加尖锐对称；三是抑制某些物质的解离或与体系的某种作用，使其只表现为一个色谱峰。第二点和第三点可能是同时发生的。

具体该怎么选择缓冲剂，我们的做法是：在起始开发方法时，并不考虑这点，首先就选择某个缓冲剂，配制某个pH的流动相，然后分析样品，如果保留、峰形及分离度不好，就改变条件，比如更换流动相的pH，查看趋势，然后选择最合适的方法参数。这时候，就有可能需要关注一下缓冲剂了。比如，你的流动相pH要求是4.0，那么你不会去考虑磷酸盐，因为磷酸盐在这里没有缓冲能力；又比如，你的方法波长为210nm，那么你就不太会去考虑醋酸盐或甲酸盐，因为这些会严重干扰基线。


那像氨基酸这种，是不是要用到缓冲能力很强的添加剂呢？


缓冲能力强不强是要看pH的，在其缓冲范围则缓冲能力强，否则就不强。氨基酸我做的很少，不是特别了解。但是氨基酸因为同时含有羧基和氨基，用酸性流动相则其氨基电离，用碱性流动相则其羧基电离，所以比较难办，可能离子对会用的比较多。
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