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主题：【讨论】打UPLC的时候峰分叉是什么原因？

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lluoxp
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发表于：2014/09/03 17:39:39 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
打UPLC的时候峰分叉是什么原因,已经更换了过滤头，流动相也更换了，并且把柱子冲了一遍，走第一次峰不分叉，走第二次峰就分叉了，还有什么原因呢
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2014/9/3 19:33:09 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
第一针的峰型如何，有没有拖尾或者展宽之类的，第一针的进样量有没有过载？
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lluoxp
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2014/9/3 20:15:11 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
进样量是10ul，应该不会过载，过载那应该是平头峰而不是分叉吧。
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0123gmail
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2014/9/3 20:35:00 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
UPLC是1.7um的那种柱子根本就不用打10ul那么多，除非你做有关物质那些需要过载的实验
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lluoxp
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2014/9/4 5:27:22 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
UPLC你们一般进样量是多少啊？
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nixiaolong
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2014/9/4 7:55:28 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
是单标的话 可能是柱效下降了
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冰块
burningsnow
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2014/9/4 8:55:06 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
样品过载、溶剂和流动相不匹配、色谱柱损坏、预柱和保护住的影响、柱塞污染等都可能出现峰分叉的可能的，从这些方面分析排除吧。
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牛一牛
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2014/9/4 11:00:11 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
首先查找一下原因，流动相和色谱柱都排除之后，那就是样品的处理方面了，如果是不同样品，第一针不分叉，第二针分叉，那就把第一针重复进3针，看后2针是否分叉；
如果是同一样品，看样品的前处理是否相同，一般溶剂的极性不要超过流动相，否则，色谱峰是有可能分叉的。
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liuquan2008
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2014/9/4 13:53:23 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
进样量1UL就够了 ，换跟色谱柱试试 一般是色谱柱的问题
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bless_99
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2014/9/4 17:27:35 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
如果峰一直分叉，那有一般是柱子的问题了，换个保护柱或者直接换根新柱子试试。
如果偶然的情况，可能是样品杂质残留在柱子里，在下一针的时候才冲出来。调一下方法，每个样品做完后大比例有机相的梯度冲洗下柱子试试。
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hujiangtao
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2014/9/5 8:19:05 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
10ul确实有点太多了，一般2ul足够用了
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