主题：【第七届原创】【许愿原创】准确检测乃实验第一位

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发表于：2014/10/31 22:45:42 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

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准确检测乃实验第一位

牛膝为苋科植物，主要生长于河南，四川、湖南、江西、福建、广东、广西、四川、云南、贵州也有少量，是一种名贵中药材。

既有消炎、止痛、抗衰老、强筋骨、补肝肾之功效，亦有利尿通淋、逐瘀通经、引血下行、活血通经之疗效。用于治疗腰膝酸痛、筋骨无力、肿痛跌打、腰膝酸痛、咽喉损伤、痈肿恶疮、头痛、牙痛等病症。

药材名贵，检测方法也应该高档，下面我们就重点介绍下高效液相色谱法检测名贵中药材牛膝中β-蜕皮甾酮含量检测。

实验部分

原理

取适量本品粉末溶解、超声提取后，经进样器进入高效液相色谱系统，C18色谱柱分离，紫外检测器检测，保留时间定性，峰面积定量（外标法）计算。

仪器及试剂

仪器：高效液相色谱仪（紫外检测器+等度泵+柱温箱），电子天平，溶剂过滤器，超声波清洗器，三号筛（药典筛），具塞锥形瓶，25ml、5ml容量瓶若干，针筒式过滤器等。

试剂：甲醇（色谱纯），甲酸（分析纯），正丁醇，超纯水。

样品配制

对照品溶液的制备：准确称取β-蜕皮甾酮对照品2.5mg于25ml容量瓶中，加甲醇至刻度，配制成每0.1mg/1ml的β-蜕皮甾酮对照品溶液，备用。

供试品溶液的制备：取牛膝药材适量粉碎过三号筛（药典筛），准确称取本品粉末lg，置于具塞锥形瓶中，加水饱和正丁醇30ml，密塞，浸泡过夜，超声处理30分钟，滤过，用适量甲醇分数次洗涤容器及残渣，合并滤液和洗涤液，旋转蒸发仪蒸干，残渣加甲醇使溶解，转移至5ml容量瓶中，加甲醇至刻度，溶解、摇匀，0.45um微膜滤过，待测。

色谱条件

检测器：紫外检测器

色谱柱：Venusil XBP C18(4.6 X 250mm，5ul)

V9520525CK0043

检测波长：250nm

流动相：乙腈：水：甲酸=16：84：0.1（V:V）

流速：1.0ml/min

柱温：室温

进样量：10ul

对照品色谱图：

六针对照品色谱图对比:

重叠图：平铺图：

对照品稀释200倍色谱图：

供试品色谱图：

六针供试品色谱图对比：

重叠图：平铺图：

对照品、供试品色谱图对比：

重叠图:

平铺图：

样品做了不少，效果也还不错。

实验可以说明一切，那就是该检测准确、可靠，该方法适合牛膝药材中β-蜕皮甾酮含量检测。

值得注意地是前处理需要注意：一是超声提取处理尽量彻底，也就是超声波清洗器功率和频率适当大一点，超声的时间可以适当的长一点，超声波中可以加一些温水；二是用甲醇洗涤容器及残渣尽量彻底，也就是洗涤次数尽量多些；三是蒸发干的残渣加甲醇尽量完全溶解后全部转移。这样能尽量保证样品在前处理过程中的损坏，保证检测更准确。