主题：【第七届原创】多波长检测名贵药材穿心莲

多波长检测名贵药材穿心莲

    穿心莲喜欢阳光充足，高温湿润的气候。现在在多地被栽培、引种，海南、广东、广西、云南、福建、江苏等地最为常见。

    该药材具有清热解毒、消炎消肿、保肝利胆、凉血止痛、抗肿瘤等药物疗效。可用于治疗感冒发热、咽喉肿痛、口舌生疮、蛇虫咬伤、顿咳劳嗽、泄泻痢疾、热淋涩痛、痈肿疮疡、肠寒麻风、皮炎湿疹、某种肝炎、脉管炎、呼吸道炎及脑炎等，对某些癌症也有一定治疗作用。

    药材质量与药物质量密切相关，药物质量需药材质量保证，药材检测重中之重。下面介绍高效液相色谱法检测穿心莲中主要成分穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯。

实验部分

实验原理

    取适量干燥本品药材，粉碎后甲醇浸泡，超声提取，进样后经C18色谱柱分离，紫外检测器检测，外标法计算，既得。

仪器

    高效液相色谱仪（等度泵+紫外检测器+柱温箱+在线脱气机+自动进样器等），超声波清洗仪，电子天平，溶剂过滤器，固相萃取装置（包括氧化铝固相萃取柱），药典筛（四号筛）等。

试剂

    甲醇（色谱纯），超纯水等

对照品溶液制备

    分别精密称取穿心莲内酯对照品、脱水穿心莲内酯对照品各5mg于50ml容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，配制成0.1mg/ml的对照品混合溶液，备用。

供试品溶液制备

    取干燥本品适量，充分粉碎后过四号筛（药典筛），精密称取0.5g过筛后粉末，置于具塞锥形瓶中，精密加入40%甲醇25ml，称定重量，浸泡1小时，超声处理大约30分钟，放冷，再次称定重量，用40%甲醇补足减少的重量，摇匀，0.45um微膜滤过。

    如果样品杂质较少，不影响检测，样品前处理到此即可，否则需做固相萃取处理，如下。

    精密量取续滤液10ml，置于中性氧化铝柱上，用甲醇15ml洗脱，收集洗脱液，置于50ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，再次0.45um微膜滤过，待测。

色谱条件

检测器：紫外检测器（具有可变波长功能）

色谱柱：C18，4.6X250mm，5.0um

检测波长：穿心莲内酯检测波长为225nm，脱水穿心莲内酯检测波长为254nm

流动相：甲醇：水=52：48（V:V）

柱温：30℃

进样量：5ul

    从以上色谱条件我们可以看出，这个样品检测需要两个检测波长，光电二极管阵列检测器检测这个肯定没问题，紫外检测器如果没有多波长检测功能，这个样品检测就会较麻烦，两种物质得分开检测，耗时、费力。

    下面我们先看看波长225nm检测效果。

穿心莲内酯对照品色谱图：



混合对照品色谱图：



供试品色谱图：



    接下来我们看看波长254nm检测效果。

脱水穿心莲内酯对照品色谱图：



混合对照品色谱图：



供试品色谱图：



    最后我们再来看看可变波长（双波长或多波长）检测效果。

波长时间表：



穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯混合对照品色谱图：



混合对照品浓度0.1ug/ml（对照品稀释1000倍）色谱图：



供试品色谱图：



    通过以上双波长检测，我们得出一些过程检测结果，下面看看吧。



结论

  以上双波长检测实验结果准确、可靠，方便、快捷，各项指标优良，该方法非常适合该样品检测。

    通过上面色谱图我们可以看出，多波长检测还是很有优势的，一是对照品我们可以配一次，二是检测我们也可以一次搞定，省时、省力、省费用，优势多多，优势明显。希望有多波长检测功能的实验室同仁们，碰到类似检测可以大胆尝试下，只要仪器没问题检测一定会很完美。