主题:【求助】液相试验开发中精密度与加标回收问题

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gdouchenjiebing
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精密度问题:一个样品在液相中连续测定5次,还是取同一样品5份制5个样在液相中分别测定1次,最后求RSD值?????
加标回收问题:比如说同一个样品中加入3个梯度的标准物,那么每个梯度重复多少遍?加入多少?我一般都是加入100ul。
推荐答案:sdlzkw007回复于2015/04/16
取同一样品5份制5个样在液相中分别测定1次,最后求RSD值
三个梯度水平分别是方法检出限量、法规最高限量、两者的中位值
补充答案:

浪淘沙隐回复于2015/04/16

精密度分为进样精密度、方法精密度(中国药典称为重复性)、中间精密度和重现性。中国药典规定,重现性仅限于订入药典的方法,是不同实验室之间的对比。
如果按照中国药典的做法,进样精密度是配制一份样品,连续进样5-6针,计算峰面积RSD;重复性是要配制6份溶液,分别进样,计算峰面积RSD;中间精密度是另外一个实验员,在另外一天,用另外一台仪器进行重复性实验。
回收率实验,是每个浓度配制3份溶液,至少需要9个数据,也就是至少3个浓度各3份溶液。中国药典现在要求进行定量限的回收率实验。所以可以是加入定量限浓度、限度的80%浓度、限度浓度、120%限度浓度。这个定量限浓度的回收率和最高浓度的回收率,是考察线性范围的一部分。

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取同一样品5份制5个样在液相中分别测定1次,最后求RSD值
三个梯度水平分别是方法检出限量、法规最高限量、两者的中位值
wslmpol
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夏天的雪
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个人认为:仪器的精密度是一个样进5针,方法的精密度是进5个样
浪淘沙隐
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精密度分为进样精密度、方法精密度(中国药典称为重复性)、中间精密度和重现性。中国药典规定,重现性仅限于订入药典的方法,是不同实验室之间的对比。
如果按照中国药典的做法,进样精密度是配制一份样品,连续进样5-6针,计算峰面积RSD;重复性是要配制6份溶液,分别进样,计算峰面积RSD;中间精密度是另外一个实验员,在另外一天,用另外一台仪器进行重复性实验。
回收率实验,是每个浓度配制3份溶液,至少需要9个数据,也就是至少3个浓度各3份溶液。中国药典现在要求进行定量限的回收率实验。所以可以是加入定量限浓度、限度的80%浓度、限度浓度、120%限度浓度。这个定量限浓度的回收率和最高浓度的回收率,是考察线性范围的一部分。
hhbbcc
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精密度分为进样精密度、方法精密度(中国药典称为重复性)、中间精密度和重现性,进样精密度我们这是1个样品重复进样6次,计算峰面积RSD;重复性,我们这是配制6份平行样品测定,测定结果的RSD;中间精密度,不同仪器,人员,时间配制6份平行样品,计算12次(包括中间精密度6次测定结果和重复性6次测定结果)RSD;重现性一般不做。
加样回收率,每个浓度配制3份样品,一共三个浓度共9份样品,三个浓度选择,记得一份电子刊物还是什么文件上说过,第一个浓度选择定量限,如果无法做出来,可以检出量的50%,再不行,限度的50%,我们这里一般用限度的50%,100%,120%
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jsdengxiao
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上面都说很多了,都很全,我们精密度一般方法验证的用,1个样进3针做的,做6个平行样也做的,平时检测的话一般就2个平行样进一针就完了。针对回收率的话,不是定死的100ul,要看你的样品浓度和标样Stock浓度来按样品80%,100%,120%来换算
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0123gmail
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回收率的加标量不是要根据样品实际含量来确定的吗?
夏天的雪
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原文由 0123gmail(v2861421) 发表:
回收率的加标量不是要根据样品实际含量来确定的吗?
不一定啊,回收率是考察样品前处理过程中的损失情况,没有检出的样品也可以做加标回收率
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