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主题：【已应助】牛血清蛋白标准曲线的测定

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天空蔚蓝
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发表于：2015/08/27 10:47:53 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
各位大神，最近在册牛血清蛋白标准曲线，资料上显示说，牛血清蛋白与考马斯亮蓝结合之后在595 nm处显示最大吸收，可是为什么我用紫外扫谱发现在578 nm处才是最大吸收，但是测出来的不同浓度的吸光度线性关系也不好，排出紫外检测器的问题，到底是什么原因呢？？？？
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一片枫叶
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2015/8/27 13:42:11 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
对于给定的检测器，在规定的检测波长下，物质溶液的吸光度除与吸光物质的摩尔吸光系数有关外，还与其摩尔浓度有关。规定的检测波长必须是吸光物质的紫外吸收截止波长（或大于其截止波长20nm），这时吸光物质的吸光度与吸光物质的摩尔浓度（在线性范围内）才有线性关系。在进样体积一定的情况下，摩尔浓度有一定的范围，低于或高于其范围都不成线性关系。
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老多_小多
emoc98311
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2015/8/27 15:33:54 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
595 nm是不是理论值，试剂不同会发生光移
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天空蔚蓝
v2993380
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2015/9/9 18:07:07 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 老多_小多(emoc98311) 发表:
595 nm是不是理论值，试剂不同会发生光移
是不是因为配制的考马斯亮蓝溶液没有过滤造成的?  同一个实验室的人他测得的最大吸光度却在596.2 nm处，我们俩用的是同一批考马斯亮蓝溶液。
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