主题：【第八届原创】茶叶中毒死蜱检测方法的探究

正文：
实验目的（实验背景及目的）：
日本食品卫生法肯定列表制度关于茶叶中毒死蜱农药残留限量基准值为10mg/kg；同时，毒死蜱是日本2015年度进口茶检疫所残留农药监控项目。茶叶提取液颜色为深褐色，若以此样液上机，将严重污染进样口及色谱柱、检测器。基于以上背景，我们进行了毒死蜱检测方法的探究。
实验方法（前处理、标准品配置、色谱条件等）：
一、前处理：
1.1    使用器具：振荡器、漩涡混合器、电子分析天平、刻度试管(10ml) 、离心机、氮吹仪、移液枪5ml、移液枪1ml、
安谱固相萃取小柱（GCB/PSA双层柱）(500mg/500mg/6ml)
1.2    试剂：石油醚Ⅱ HPLC、乙酸乙酯HPLC、纯水、无水硫酸钠：分析纯，650℃煅烧4h干燥器储存备用。
乙酸乙酯+石油醚Ⅱ(1+1)：量取100ml乙酸乙酯，加入100ml石油醚，摇匀备用。
1.3 提取：
将茶叶样品粉碎，取样品0.5g到具塞刻度试管(10ml)。在装有样品的具塞刻度试管(10ml)里，加入1.5ml水，浸泡10min后，加入无水硫酸钠至饱和，在漩涡混合器上振荡使样品和无水硫酸钠充分混匀。加入3ml乙酸乙酯在漩涡混合器上振荡3min。于离心机以3000转/min的转速离心5min，吸取上清液到刻度离心管(10ml)。重复提取两次，用石油醚Ⅱ：乙酸乙酯＝1：1混合液提取一次，合并四次收集到的上清液，于35℃氮吹仪浓缩至2ml以下，以乙酸乙酯定容至2ml，待净化。
1.4净化：
以6ml乙酸乙酯预淋洗GCB/PSA固相萃取柱, 弃去流出液。将提取液加入SPE柱中，用6ml乙酸乙酯及4ml（石油醚Ⅱ：乙酸乙酯＝1：1）洗脱，收集洗脱液，35℃氮吹浓缩到1ml以下，以乙酸乙酯定容为1ml。吸入1ml一次性的注射器中，0.22um有机滤头过滤，注入样品瓶，供GCMS TQ8030上机测定。
二、标准品
2.1毒死蜱标准品 100mg/kg  AccuStandard
2.2毒死蜱准储备液：将100mg/kg的毒死蜱标准液以乙酸乙酯稀释成适当浓度的标准工作液；
2.3毒死蜱标准工作液：吸取一定量的标准工作液，以空白基质定容至1ml，分别稀释成0.005mg/kg、0.015mg/kg、0.025mg/kg、0.035mg/kg、0.045mg/kg的标准工作液。
三、色谱条件
3.1仪器：气相色谱-串联质谱：岛津GCMS-TQ8030
3.2色谱柱：RESTEK RTX®-5MS 30m*0.25mm*0.25um
3.3分析条件：
3.3.1气相参数：
Oven Temp:

	Rate	Final Temp	Hold Time
0	-	50	0
1	10	136	10
2	40	280	2

Injection Temp: 250℃
Flow Control Mode: Pressure
Pressure: 100KPa
Flow: 1.69ml/min
3.3.2质谱参数：
Ion Source Temp: 230℃;  Interface Temp: 280℃ ;  Acq.Mode: MRM;

Compound Name	Start time	End time	Ch1 m/z	Ch1 CE	Resolution	Resolution
chlorpyrifos	6.00	15.00	313.90>257.90	14	Unit	Low
chlorpyrifos	6.00	15.00	313.90>285.90	8	Unit	Low
chlorpyrifos	6.00	15.00	313.90>193.90	28	Unit	Low

实验过程照片：






最终得到的样液颜色很浅，可有效保护进样口、色谱柱及仪器的洁净。