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主题：【第八届原创】用96-微孔板分光光度计检测薯蓣皂苷元的含量

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ruyuhaha
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发表于：2015/09/17 12:56:08 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
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1. 实验材料
薯蓣皂苷元标准品母液的配置：精确称取薯蓣皂苷元标准品（纯度98%）5mg，溶于10ml甲醇中，母液浓度为0.5mg/ml（0.5μg/μL），现用现配；
2. 实验方法
标准曲线的建立：分别吸取0、4、8、12、16、20μL 薯蓣皂苷元标准母液于新的96微孔板的每个孔中，每个浓度3个重复，室温条件下挥干溶剂，然后每个孔内添加200μL 70-72%的高氯酸，然后迅速将微孔板放入经预热的微孔板分光光度计内，35℃，摇振2min，静止10min后，在350nm～700nm波长范围内扫描其最大吸收波长，并在最大吸收波长下测定吸光值，根据最大吸收波长及系列标准溶液中的diosgenin的含量，绘制标准曲线。
  图1为薯蓣皂苷元在在350nm～700nm波长范围内的光谱扫描图，根据图1所示，可确定其最佳吸收波长为410nm。
  图2为根据高氯酸显色分光光度法最终得到的标准曲线，线性回归方程为y=0.1218x+0.0404，r=0.9988。y代表410nm处的吸光值，x代表反应体系中的diosgenin含量（μg）。

图1 薯蓣皂苷元的光谱扫描图


图2 薯蓣皂苷元的标准曲线



3.结果与讨论
样品中薯蓣皂苷元含量的确定：将提取制备的薯蓣皂苷元粗提物用甲醇完全溶解，然后吸取体积的样品溶液至新的96-微孔板的孔内，室温下挥干溶剂，然后按照上述实验条件进行检测，最后根据其在410nm处的吸光值和线性回归方程y=0.1218x+0.0404计算，可得出薯蓣皂苷元的含量。
该帖子作者被版主 过年杀只猪加 10积分， 2经验，加分理由：原创
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tutm
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2015/9/19 11:15:24 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
使用的仪器是啥样的？
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qianguiyun1
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2015/9/20 15:33:12 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
微孔板没有见过，能不能普及一下？
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小虾米
wuxia330
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2015/9/26 9:25:04 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
实验数据很少啊
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onlyyousky
onlyyousky
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2015/9/30 10:27:22 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
其实提取比较关键
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暗夜精灵
jbcng
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2015/9/30 19:38:23 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
内容比较短。能多讨论一下吗
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