酸浆(拉丁文名:Physali alkekengi L.)又名红菇娘、挂金灯、戈力、灯笼草、灯笼果、洛神珠、泡泡草、鬼灯等北方称为菇蔫儿、姑娘儿，以果实供食用。
化学成分含酸浆苦素A(Physalin A)、酸浆苦素B、酸浆苦素C、木犀草素(Luteolin)及木犀草素-7-β-D-葡萄糖甙。果实含枸橼酸、草酸、维生素C、酸浆红色素(physalien)、酸浆醇(physanol)A，B。花萼含α胡萝卜素、酸浆黄质(physoxanthin)及叶黄素等，种子油的不皂化物中分得多种4α-甲基甾醇，主要为禾本甾醇(gramisterol)和钝叶醇(obtusifoliol)及4种新甾体。此外尚含多种4-脱甲基甾醇，如胆甾醇和24-乙基胆甾醇等。还含有多种三萜3β-一元醇，其中环木菠萝烷醇(cycloartanol)35%，环木菠萝烯醇(cycloartenol)27%、羊毛脂-8-烯-3β-醇(lanost-8-en-3β-ol)。
木犀草素（luteolin）是一种天然黄酮类化合物，存在于多种植物中，具有抗炎、抗肿瘤、抗过敏等方面的作用。化学是如下：

目前，国内传统中药有效成分的提取方法普遍存在提取率低、杂质清除率不高、生产周期过长、能耗高、溶剂用量大等缺点。随着中药现代化进程的不断深入，许多现代高新技术不断地被应用到中药有效成分的提取和分离，使得中药有效成分的提取更高效和简便。超声-微波协同萃取技术直接将超声振动与开放式微波两种作用方式相结合，充分利用超声波振动的空化作用以及微波的高能作用，实现了低温常压条件环境下，对固体样品进行快速、高效、可靠的预处理,与常规提取方法相比，超声-微波协同萃取技术具有快速、节能、节省溶剂、污染小等优点。
本实验应用超声-微波协同萃取法提取酸浆中的木犀草素及木犀草素-7-β-D-葡萄糖甙，采用高效液相-二极管阵列检测法（HPLC-DAD）测定提取物中木犀草素及木犀草素-7-β-D-葡萄糖甙的含量，药材中二者成分的含量分别为：1.200mg/g 和0.43mg/g，二个峰，木犀草素-7-β-D-葡萄糖甙峰位置分别为：221nm，270nm，木犀草素峰位置分别为：226nm，
276nm，由于木犀草素-7-β-D-葡萄糖甙比木犀草素多了一个 β-D-吡喃葡萄糖基团，天麻素二个峰位置都发生了蓝移，样品中二个峰的光谱图与标准品二个峰的光谱图相同，可以进
一步确定酸浆中含有木犀草素及木犀草素-7-β-D-葡萄糖甙。
主要仪器与试剂
主要仪器
Agilent1100型四元梯度高效液相色谱仪（美国 Agilent 公司）
Agilent TC-C18(ODS)色谱柱（5μm，4.6×250mm，美国 Agilent 公司）
CW-2000 超声-微波协同萃取仪（新拓微波溶样测试技术有限公司）
DJ-10A 型倾倒式粉碎机（上海隆拓仪器设备有限公司）
RE-52AA 型旋转蒸发仪（河南巩义仪器厂）
LXJ-IIB 型低速大容量多管离心机（上海安亭科学仪器厂）
试剂
木犀草素（中检所，含量98%；）
木犀草素-7-β-D-葡萄糖甙（中检所，含量98%；）
酸浆全草（采于黑龙江）
除甲醇、乙腈为色谱纯（国药集团化学试剂有限公司），其余试剂除专门提到外，
均为分析醇，实验用水为二次蒸馏水。
实验方法
供试品溶液的制备
精密称取酸浆粉末1.0g，置于超声-微波萃取仪玻璃容器中，加入50mL70%
甲醇，开启超声微波，控制在恒温50℃下提取40min，萃取3次，合并提取液，浓
缩至近干，残渣加入甲醇溶解，转移至10mL 量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，
过0.45μm 的微孔滤膜，取续滤液，即得。
提取条件的考察
溶剂的选择：精密称取酸浆粉末1.0g，置于超声-微波萃取仪玻璃容器中，分别用水、70％甲醇、70%乙醇溶液超声-微波协同萃取40min（n=3），萃取3次，合并提取液，浓缩至近干，残渣加入甲醇溶解，转移至10mL 量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，过0.45μm的微孔滤膜，取续滤液，HPLC 测定萃取率。
溶剂体积分数的选择：分别用体积分数为40%、50％、60％、70％、80％、90％和纯甲醇溶液超声-微波协同萃取30min（n=3），方法同上。
溶剂用量的选择：分别用10mL、20mL、50mL、80mL、100mL70%甲醇提取，方法同上。
提取时间的选择：分别用70%甲醇超声-微波协同萃取20min、30min、40min、50min、60min（n=3），方法同上。
提取温度的选择：分别在40、45、50、55、60℃下用70%甲醇超声-微波协同萃取40min，方法同上。
对照品溶液的制备
分别精密称取常温减压干燥12h 的木犀草素及木犀草素-7-β-D-葡萄糖甙对照品适量，加甲醇配制成木犀草素-7-β-D-葡萄糖甙为200μg/mL、木犀草素为100μg/mL 的混合对照品溶液，冷藏备用。
色谱条件
色谱柱：Agilent TC-C18柱（5μm，4.6×250mm）；流动相：A-0.1%乙酸水溶液；B-甲醇，线性梯度洗脱：0～30 min，3%～5% B；30～35 min，5%～20%B；35～40min，20%～20%B；检测波长：270nm；流速：1mL/min；柱温：30℃；进样量：20μL。
结果与讨论
提取条件的优化结果
溶剂的优化结果：分别用水、70％甲醇、70%乙醇溶液超声-微波协同萃取30min（n=3），结果表明70%甲醇提取木犀草素-7-β-D-葡萄糖甙的量较高，而木犀草素的量差异不明显，因此选择70%甲醇提取。
溶剂体积分数的优化结果：分别用体积分数为40%、50％、60％、70％、80％、90％和纯甲醇溶液超声-微波协同萃取30min（n=3），结果表明，在甲醇体积分数<70%时，木犀草素-7-β-D-葡萄糖甙和木犀草素的提取率随着甲醇浓度的增加而增加；但当甲醇体积分数在70%以上时，木犀草素葡萄糖甙的提取率呈现下降趋势，木犀草素没有明显的变化。木犀草素葡萄糖甙属于一种苷，分子量小，极性较大，当甲醇体积分数过高时，溶液极性降低，使得极性较强的木犀草素葡萄糖甙不易溶出，而木犀草素极性相对木犀草素葡萄糖甙小，影响不明显，因此实验选择70%甲醇作为提取溶剂。
溶剂用量的优化结果：分别用10mL、20mL、50mL、80mL、100mL70%甲醇提取，结果表明溶剂体积在50mL时木犀草素葡萄糖甙和木犀草素的提取率最高，之后随着溶剂用量的增加，木犀草素葡萄糖甙和木犀草素的提取率趋于稳定，因此溶剂用量选用50mL 进行提取。
提取时间的优化结果：分别用70%甲醇超声-微波协同萃取20min、30min、40min、50min、60min（n=3），结果表明超声-微波协同萃取时间从20~40min的过程中木犀草素葡萄糖甙和木犀草素的提取率逐渐增加；而提取时间超过40min之后，提取率反而逐渐下降。超声-微波协同萃取时间太长，植物中大量细胞细胞破碎，使得大量粘性物质等进入提取液，溶剂杂质增多、粘度增大，影响了有效成分的溶出，有效成分含量反而减少，因此选择提取时间为40min。
提取温度的优化结果：分别在40、45、50、55、60℃下用70%甲醇超声-微波协同萃取40min，实验表明，提取温度在50~60℃的范围内，木犀草素葡萄糖甙和木犀草素的提取率没有明显差异，考虑到温度太高容易破坏活性成分，因此选择提取温度为50℃。
流动相的考察
在实验过程中，流动相首先考察了甲醇-水、乙腈-水等度洗脱对酸浆超声-微波协同萃取样品溶液进行分离，乙腈-水作为流动相时，出峰较快，不能较好地把木犀草素葡萄糖甙和木犀草素与其他杂质成分分离；甲醇-水作为流动相时，出现峰形拖尾现象，分离效果不理想。为改善上述现象，改用0.1%乙酸代替水并采用梯度洗脱，经过反复筛选之后，最终确定流动相组成为 A -0.1%乙酸水溶液， B -甲醇，洗脱程序为0～30 min , 3%～5% B；30～35 min ，5%～20% B ；35～40 min 20%～3% B，木犀草素葡萄糖甙和木犀草素和其他杂质成分能够很好的分离，得到较理想的色谱图。
对照品溶液和酸浆萃取样品的HPLC-DAD 分析
下图分别显示了在上述的色谱条件下，采用 DAD 进行检测得到的两种混合对照品及酸浆萃取样品的 HPLC 分离色谱图。图1色谱图中木犀草素葡萄糖甙和木犀草素的保留时间分别为18.74min, 26.87min，根据保留时间判断，图2中的 a、b 色谱峰分别初步鉴定为木犀草素葡萄糖甙和木犀草素。图3、4分别显示了混合对照品和酸浆萃取物中保留时间18.74min, 26.87min 的色谱峰进行 DAD 检测后得到的光谱图，木犀草素葡萄糖甙和木犀草素 UV 光谱图形状相似，出现二个峰，木犀草素葡萄糖甙峰位置分别为：221nm，270nm，木犀草素峰位置分别为：226nm，276nm，由于木犀草素葡萄糖甙比木犀草素多了一个 β-D-吡喃葡萄糖基团，木犀草素葡萄糖甙二个峰位置都发生了蓝移，样品中二个峰的光谱图与标准品二个峰的光谱图相同，可以进一步确定酸浆中含有木犀草素葡萄糖甙和木犀草素。

线性范围的考察
精密移取上述混合对照品溶液0.1，0.5，1，2，3，4，5mL 定容于5mL 量瓶
中，用甲醇稀释配制成不同质量浓度的混合对照品溶液。吸取混合对照品系列溶
液，进样20μL，按上述色谱条件测定峰面积，重复进样3次，以峰面积平均值（Y）
为纵坐标，对照品浓度 X（X:μg/mL）为横坐标,绘制标准曲线，计算回归方程：
木犀草素葡萄糖甙：Y=2562.90X+936.33 （R²=0.9999）
木犀草素：Y=10135.00X+451.33 （R²=0.9998）
结果表明：木犀草素葡萄糖甙在2μg/ml～200μg/ml范围内，木犀草素在1μg/ml～100μg/ml 范围内呈良好的线性关系。
精密度试验
精密吸取同一浓度的混合对照品溶液连续进样 6 次，结果见表 1，木犀草素葡萄糖甙和木犀草素峰面积的相对标准偏差分别为 0.60%和 0.36%，说明本方法精密度
良好。

重复性试验

取酸浆药材按优化后的条件进行样品溶液制备，平行制备 6份供试品，按色谱条件测定，结果见表2，木犀草素葡萄糖甙和木犀草素峰面积的相对标准偏差为 1.15%和 1.07%，结果表明本提取方法的重复性良好。

稳定性试验
取酸浆药材按优化后的条件制备一份样品溶液，分别在 0，2，4，6，8 ，12，24h 测定，结果见表3，木犀草素葡萄糖甙和木犀草素峰面积的相对标准偏差分别为 1.06%和 1.19%。表明供试品在 24h 内稳定性良好。

加样回收实验
取酸浆药材（过 80 目筛）6 份，各约 1.0g，精密称定，分别精密加入木犀草素葡萄糖甙1.4mg 及木犀草素0.5mg，按优化后的方法制备，按色谱条件测定。算得木犀草素葡萄糖甙和木犀草素的平均回收率分别为 95.48%和 92.23%。
样品测定
取酸浆药材，制备供试品溶液，进样测定，以外标法计算样品中两种物质的含量，测得酸浆中木犀草素葡萄糖甙和木犀草素的含量分别为 1.430mg/g 及 0.562mg/g，相对标准偏差为 0.94%和 0.25%。