内标的基本要求
1. 供选作内标的化合物或药物,其理化性质必须和被测组分十分相近
例如,内标在水相和有机相中的分配情况、挥发性、对萃取容器的吸附性以及层析行为等应与被测组分相似 。分配行为与挥发性近似,才能保证与被测组分有平行的回收率;层析行为相近,其保留时间、峰形才能与被测组分近似,二者峰面积(或峰高)比值才恒定
2. 内标的色谱峰应靠近被测组分的色谱峰,最好位于几个被测组分色谱峰的中间,但又能完全分离
3. 内标浓度的选择
一般内标加入量应控制在使标准曲线中段的目标化合物与内标物响应值(注意不是浓度)比近似为1
4. 对内标的纯度要求
从实际应用角度出发,不苛求内标具有高纯度与高含量,只要求在同一次测定中,标准曲线和样品各管内内标加入量相等
5. 内标物能很好地溶解在样品中,但不能与样品发生化学反应