主题：【第十届原创】【老手回家】 +[前处理分享】+蔬菜中农药残留检测之有机磷加标试验

                    【老手回家】 +[前处理分享】+蔬菜中农药残留检测之有机磷加标试验
                                    鹤壁市农产品检验中心 王丽娟
我日常主要是进行蔬菜中农药残留的检测的工作，用的是NY/T 761-2008方法，有网友已经帖出有机磷与有机氯的做法，我主要谈一下蔬菜中农药残留检测中有机磷加标的做法。
一、前处理部分
1 实验部分
1.1 仪器与试剂
GC450气相色谱仪（美国布鲁克公司），PFPD检测器，高速分散均质机(上海标本模型厂)、氮吹仪、快速混匀器。乙腈（色谱纯）、丙酮（色谱纯）、氯化钠（分析纯）。
1.2实验方法
根据《蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留检测方法》（NY/T 761-2008）进行检测。
1.3 标准溶液的配置
由农业部环境保护科研监测所提供，质量浓度均为100ug/mL，有机磷的标液用丙酮稀释10.0 ug/mL继续稀释浓度为0.4ug/mL和1.0ug/mL.
1.4实验条件
有机磷检测条件  色谱柱：VF-5MS（30m×0.25mm×0.25um）；温度：80℃保持1min，以20℃速度上升到130℃，再以5℃上升到200℃，再以15℃上升到250℃，保持11min。进样体积：1uL；进样品：250℃，不分流进样；检测器300℃；进样口温度：250℃；氮气流速：30mL/min；柱流速：2mL/min；空气流速：17mL/min；氢气流速14mL/min。
已经有网友详细介绍了有机磷和有机氯的做法，我现将实验过程简单介绍一下。
1.5实验过程
我这次做的样品号为24号， 将样品破碎后混匀装入样品盒内
准确称取样品25.0g，称取5-7克盐。

图1：准确称取样品，称取5-7克盐。

图2：空白样与两个加标样品分别加入50mL乙腈。

将已加入乙腈的样品进行匀浆，匀浆过样品过滤到具塞量筒中，收集滤液。过滤前用纯水湿润滤纸，过滤结束时用玻璃棒压滤纸挤净滤液。

图3：匀浆及过滤

过滤结束后震荡1分钟，静置30分钟，分层后用大肚管吸取10mL乙腈相于小烧杯中。放入氮吹仪在80度水浴上氮吹近干。

图4：剧剧烈震荡具塞量筒、吸液及80度氮吹

图5：氮吹近干时，加5mL丙酮。盖铝箔，在混匀器上混匀。

图6：用一次性针管吸液。过滤膜后上机测定，有机磷前处理到此结束。

二、加标过程
2.1有机磷加标量
    质量浓度均为100ug/mL，有机磷的标液用丙酮稀释至刻度10ug/mL
①乙酰甲胺磷标液浓度为10ug/mL，吸1mL到25g样品中，加标量为0.4ug/g，
②甲胺磷标液浓为10ug/mL,吸1mL到25g样品中，加标量为0.4ug/g，
③亚胺硫磷的标液浓度为10ug/mL,吸1mL到25g样品中，加标量为0.4ug/g，
④氧化乐果的标液浓度为10ug/mL,吸1mL到25g样品中，加标量为0.4ug/g，
⑤甲拌磷亚砜的标液浓度为100 ug/mL，吸250ul到25g样品中，加标量为1.0 ug/g
⑥三唑磷的标液浓度为100 ug/mL，吸250ul到25g样品中，加标量为1.0 ug/g，配制完成后上机测定峰面积和保留时间
2.2有机磷基质配标液
根据计算公式：标液浓度×吸出量=所配标液浓度×容量瓶容量，将24号空白样品前处理最后定容的5.0mL液体，2mL倒入小瓶进样，其余3mL用来配制混标，此溶液为基质溶液。
①乙酰甲胺磷标液浓度为10ug/mL，按公式计算需吸80ul到2mL基质溶液中，配制浓度为0.4ug/mL，
②甲胺磷标液浓为10ug/mL,按公式计算需吸80ul到2mL基质溶液中，配制浓度为0.4ug/mL，
③亚胺硫磷的标液浓度为10ug/mL,需吸80ul到2mL基质溶液中，配制浓度为0. 4ug/mL，
④氧化乐果的标液浓度为10ug/mL,需吸80ul到2mL基质溶液中，配制为0.4ug/mL，
⑤甲拌磷亚砜的标液浓度为100 ug/mL，需吸20ul到2mL基质溶液中，配制浓度为1.0 ug/mL
⑥三唑磷的标液浓度为100 ug/mL，需吸20ul到2mL基质溶液中，配制浓度为1.0 ug/mL，配制完成后上机测定峰面积和保留时间

图7：样品加标及基质加标

图8：基质P加标图谱

图9: 24号空白样品图谱

图10:24-1加标图谱

图11:24-2加标图谱

2.2加标回收率

三、结论
从气相方面来说，要保证数据准确，一定要注意以下几方面：
1、要保证数据准确，前处理过程一定要认真，在10mL吸液时一定要准确。
2.80度水浴氮吹仪定不能吹干，不然会造成回收率偏低。
3、基质配标液：我在网上看到有些网友用基质配标液，这是很有必要的，因为分析甲胺磷、氧化乐果等强极性农药时，其热稳定性较差，且易被衬管内壁、色谱柱头的活性点吸附，用纯溶剂配制标准溶液进样，响应较低，灵敏度差，回收率会高达200%，解决的办法是用同基质的样品溶液配制标准溶液，以解决基质效应。
3、保持进样口与色谱柱干净，应注意及时更换衬管或老化色谱柱等。
4、乙酰甲胺磷、甲胺磷及氧化乐果回收率偏低，求高手指点。