月旭Ultimate XB-C18 XXX药厂寿命异常短原因分析
随着色谱技术的发展,高效液相色谱仪在分析领域特别是药品分析领域得到了广泛使用,而其最大的消耗品便是液相色谱柱。液相色谱柱是一种特殊的分析耗材,具有一定寿命,价格相对比较贵,可以通过提高色谱柱的使用时间,降低成本。而且色谱柱具有特殊的选择性,在使用一款柱子后,一般不会随意去更换。
所以当色谱柱出现异常情况,原因的分析显得尤为重要了。
问题背景:
销售反馈,客户使用许多Ultimate®XB-C18(4.6*250mm,5um)柱子做头孢地嗪钠,药典方法,柱子使用寿命比较短,其中有2根柱子使用时间不足半个月,实际进样针数不足100针,冲洗维护后没有明显的改善效果。建议寄回维护,“解剖”查找原因。
“解剖”分析步骤:
(同时寄回多根柱子,表现的现象和柱子检测数据都相当,故就放了一根柱子的检测数据)
流动相:甲醇/水=75/25;流速:1.0ml/min;柱温:室温;
样品溶液:尿嘧啶,苯酚,4-氯硝基苯,甲苯的户混合溶液;甲苯的浓度为850ug/ml,用流动相溶解;
判断标准:以甲苯的柱效>20000和拖尾因子(0.9-1.1)的结果为准;
1、 寄回时验证检测:(柱压:166bar)
2、检测过程:打开柱头端,筛板堵塞,填料污染,有板结现象,更换新的填料和筛板;
3、维修后检测:(柱压:140bar)
4、维修后检测不能满足出厂检测标准,是否是柱头端填料污染太严重,没有彻底更换,故反向进行检测(柱压:145bar);
可能原因判断:
使时间不是特别久的色谱柱,出现这种维修后没有效果,反着进样任然柱效很差的结果,而客户检测的化药原料药,样品溶液及时配置更换过滤,排除样品中的强保留物质污染色谱柱的可能性;流动相中有缓冲盐,那可能是缓冲盐析出,或者流动相配置使用时间较久,流动相变质堵塞污染色谱柱导致。
验证步骤:
1、回收填料,用有机试剂清洗,目的是清洗掉强保留物质即弱极性物质,清洗以后,填料还是出现板结的现象;
2、 用有机溶剂和水清洗以后,填料回复正常的粉状,重新装柱子,检测合格。
3、重新装柱检测(柱压:142bar);
结果:产品合格;
后续:
检测合格的色谱柱给客户以后,客户能正常使用,那说明填料已经恢复了活性。而罪魁祸首就是析出的缓冲盐,为了避免这样的问题发生,使用之前一定要用高比例的水先过渡仪器和色谱柱,再换成盐相。
小结:
出现色谱柱寿命异常短而不能接受该分析成本的情况下,建议和色谱柱厂家进行沟通,厂家会给一定的维护建议,还是不能恢复,可以要求寄回厂家,进行解剖,原因解析,进行针对性的使用建议。在满足分离要求的前提下,选择能解决损坏问题的柱子,反相C18常见的问题列举如下: