主题:【分享】如何选择流动相的ph?(1)

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什么时候需要缓冲溶液?



在反相色谱分析中,流动相的pH值一般在2-7之间,当分析物在反相条件下可离解,或样品的pH值在2-7之外时,就需要缓冲液,在反相条件下可离解的化合物一般有氨基和羧基,他们的pKa在1-11之间,选择正确的缓冲液pH值可保证可离解的官能团处于一种形式,离子形式或中性化合物的形式;如果样品的pH值对柱子有伤害,则缓冲溶液可使其变温和或减小其危害,常规硅胶基质色谱柱的pH耐受范围2-8。



如何选择缓冲液pH值



在选择缓冲液pH值之前,应先了解被分析物的pKa,高于或低于pKa两个单位的值,有助于获得良好的峰形,溶液PH值高于或低于两个pKa两个单位,化合物99%以一种形式存在。一种形式存在的化合物才能获得好的尖锐的峰。



先了解几个概念

缓冲溶液:能抵抗外来少量强酸、强碱或稍加稀释,而能保持其pH基本不变的溶液,称为缓冲溶液(buffer solution)。





缓冲溶液对强酸、强碱或稀释的抵抗作用称为缓冲作用(buffer action)

缓冲容量(b):使单位体积缓冲溶液的pH改变1个单位时,所需加入的强酸、强碱的物质的量。是衡量缓冲溶液缓冲能力大小的尺度。单位:mol/L·pH或mmol/L·pH



pH:氢离子浓度指数(hydrogen ion concentration)是指溶液中氢离子的总数和总物质的量的比。





pKa:

缓冲溶液组成

普通缓冲溶液:由共轭酸碱对组成,用于控制溶液酸碱度。



标准缓冲溶液—它是由规定浓度的某些逐级离解常数相差较小的单一两性物质或不同型体的两性物质所组成。校正pH计用的标准缓冲溶液,如酒石酸氢钾、邻苯二甲酸氢钾、硼砂的溶液也具有缓冲作用。
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