主题:【求助】高效液相色谱聚合物分析

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1,检测不同药物所称取的葡聚糖2000的量不同,有的是50mg到50ml容量瓶,有的是25到50,还要稀释5倍。怎么定位这些用量的?
2,聚合物谷高比说是用来看分离度的,但是测谷高比的溶液是样品加前面所稀释的葡聚糖2000溶液。原理是什么,为什么可以体现分离度。
3,走葡聚糖2000溶液是属于走系统适用性,分别在A.B两个流动相中走,在只有水的流动相B中走的时候,理论塔板数,拖尾因子都很好,但是在加了十二水合磷酸氢二钠及二水合磷酸二氢钠,水作为溶剂的流动相 A中走的时候,拖尾因子都很大。要怎么改善?
同样的流动相换过柱子走出来还是一样,所以应该不是柱子问题。
4,有一个药物之前聚合物峰分离不出来,然后尝试改变了流动相ph值,就可以走出来了,但是跟操规所规定的ph差比较多,操规要求7.0,而我自己尝试的能走出峰的流动相的ph值为6.5,但是用这个流动相走出来的系统适用性的拖尾因子也是很大。也尝试过调节流动相到6.8,聚合物还是跟主峰分离不出来。而且主峰跟之前的比,变胖和变矮了。但是同样的柱子去做别的样品是没有问题的。
麻烦各位给解答下

图1是分离不出的聚合物峰
图2是以前正常分离的聚合物峰
图3是正常的主峰
图4是变胖变矮的主峰



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