主题:【第十二届原创】液相色谱流动相过滤为哪般?

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夏沫
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        毫无疑问说到十分精密的仪器中大家几乎都会想到液相色谱仪液相色谱是十分精密的仪器,对于结果的准确性有很高的要求。我们在做样品处理的时候每一步都要格外的注意。在使用液相色谱时大家要按照要求使用色谱纯试剂作为流动相,在使用时要过滤流动相。大家也许会产生以下疑问:
1、为什么要过滤呢?
答案:过滤是为了除去流动相中的不溶性杂质和气泡,流动相过滤后可以保护液相的管路和色谱柱,延长色谱柱的使用寿命,并增强数据的精确度。
2、我这流动相非常干净呀,一点杂质都看不到,为什么还要多此一举的过滤呢?
答案:必须要过滤,很多东西是肉眼难以观察到的,不是你看着非常澄清就真的干净。液相的管路非常的细,而且色谱柱的孔径也很小,如果不过滤造成堵塞,会造成很大的麻烦。所以大家要记得过滤哦!
3、先过滤还是先超声?既然过滤也可以除气泡,那过滤后还有必要进行超声吗?
答案:先过滤除去不溶性杂质或异物,同时可以除去气泡,再超声进一步去除气体。超声还有帮助溶解和使溶液混合更加均匀、降低基线噪音等作用。所以还是有必要的。
4、我用的是色谱纯还需要过滤吗?
答案:色谱纯在出厂前全部都通过0.22μ的膜过滤过了,如果单独做流动相使用则可以不必过滤,如果混合使用则混合后还要经过过滤膜过滤。
        了解了为什么要过滤流动相,接下来我们再看看过滤中又会遇到的让我们疑惑不解的问题吧!
5、过滤膜该按照什么去进行选择呢?
答案:选择过滤膜呢首先要考虑过滤膜的材质,要看过滤的液体与过滤器化学相容性,过滤前要查看一下化学兼容性表。其次要看滤膜的孔径,一般如果色谱柱是5μm,选择0.45μm的滤膜就可以,如果是3.5μm或3.0μm,这时就要选择0.22μm的滤膜。还有根据样品的特性去选择材质适合的膜。
6、用什么来进行过滤?
答案:使用专门的流动相过滤器,不仅操作简单,而且也比较安全。比如下图仪器
 
采用优质特硬玻璃材料,使用便捷耐压性好,按照国际标准尺寸制作,互换性好,可与国外多种品牌互配,可在高温高压下灭菌使用、密封性能好、流量快、标准磨口。铝合金夹子采用合金铝材制成,强度高、不变形。
7、如何使用过滤器?
           
答案:溶剂过滤器一般包括:三角积液瓶,砂心过滤头,滤杯,固定夹,防尘盖,胶管,胶管链接器。
1)先将砂芯过滤头安装于三角积液瓶上。
2)取流动相过滤膜放在砂芯过滤头上,滤膜要完全覆盖砂芯区域。
3)用滤杯压住滤膜,并用铝合金夹子夹住砂芯过滤头上边和滤杯下边。
4)用胶管连接溶剂过滤器和真空泵。
5)开启真空泵,并将流动相倒入滤杯中,流动相过滤后到三角积液瓶中。
6)先拔下连接过滤器一端的胶管,然后再关闭真空泵。
7)过滤好的流动相转入溶剂瓶中,超声脱气20min以上后使用。
备注:转移时避免过滤后的流动相二次污染。
8、过滤了一会过滤器停了,该怎么办?
答案:首先检查供给管道内是否进了空气,如果进入空气关闭真空装置,干燥过滤器,并换上干燥的滤膜,重新开始过滤。其次检查真空装置是否有良好的密封性。如果过滤未停止但液体流量逐渐变小,建议更换滤膜。
9、过滤器操作要注意哪些事项?
答案:必须用干燥的过滤膜和干燥的滤杯进行过滤,在将过滤膜放在滤器上之前,须确保滤器是清洁、干燥的。
10、过滤器使用后需要清洗吗?
答案:过滤器使用后要及时清洗, 按照过滤流动相的步骤,依次抽滤异丙醇,纯净水来清洗砂芯内部,清洗干净后烘干备用。
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zyl3367898
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dadgoh
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使用HPLC级的溶剂做流动相,最好也要过滤。以去除玻璃瓶口及塑料密封等掉的碎渣。
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