主题:【已应助】未知样品怎样确定HPLC条件?

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whrboy
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未知样品怎样确定HPLC条件?
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未知化合物应先进行结构确认,了解该化合物的结构特点,再根据结构特点选择合适的色谱方法。
一般为:
根据溶解性选择溶解溶媒;
根据紫外扫描确定检测波长;
根据检测波长选择流动相有机相种类(一般是甲醇或乙腈,低波长吸收最好选乙腈);
缓冲盐的种类一般为磷酸盐或醋酸盐,浓度不大于0.05mol;
流速一般从1.0开始;
柱温室温最好。
进样量要根据主峰的响应值来确定,一般为定量限的5000倍;
由此可初步建立一个色谱条件,再根据洗脱情况进行优化。
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