主题:【已应助】制备液相使用求助

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chen04252003
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甲醇-水流动相也会有很明显的紫外吸收吗?我用分析液相(色谱柱250*4.6mm)摸的条件,等度洗脱甲醇-水(60:40)在16分钟左右210nm波长处有一个峰,可是用制备液相(色谱柱250*20mm),流速15ml/min进样,,每次都在在2.8-4min会有一个峰出现,之后便没有峰出现(走了50min也没有)。别的样品改用别的比例(比如甲醇-水50:50,40:60)也都是在2.8-4min作用会有一个峰型相当的峰出现。我用纯甲醇进了一个,也是在那个时间出了峰。我想知道我的样品峰哪儿去了?上面描述的步骤哪个环节出了问题了?是流动相比例的问题,还是流速、色谱试剂的问题?请各位前辈指教,不胜感激!
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chen04252003
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我平时做制备,摸方法用的是制备柱厂家配的分析柱,分析上建好的方法放大到制备上,基本没问题。但是如果用其他公司的分析柱建好的方法放大到制备上,还是有差别的。16min出峰有点晚,如果不影响分离建议有机相改为乙腈,出峰快一点,峰型尖锐一点,回收率会高很多,只要满足分离,我们希望能有多快就多快,省溶剂,效率高。
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