主题:【已应助】高效液相测胆固醇中,皂化浓缩后无法用乙醇溶解

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malibing
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我是做“乳酸菌体外降胆固醇实验”的,在培养基加入了胆固醇胶束溶液,培养后,离心取上清液测胆固醇,采用的是《食品中胆固醇的测定》GB/T22220一2008
(高效液相色谱法)。
      在完成皂化提取的步骤后,在浓缩这一步出现了问题:即无法用无水乙醇完全溶解平底烧瓶中的残留物,这些残留物是有点像甘油的透明物质,加热,超声都无法解决。但是按原理说是乙醇时可以溶解甘油的,也不知道里面是什么物质,为什么不能用乙醇来溶解。后来用甲醇也无法溶解(甲醇为流动相),而国标上是直接用无水乙醇溶解。
    当然用氯仿等其他有机物可以溶解,但是氯仿会对液相的反相柱有伤害,而其他有机物比如叔丁醇、正己烷等,则我的流动相等液相参数就会有相应调整。所以还是希望直接用国标的方法来解决,不知道大家有没有遇到类似的情况啊?
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malibing
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你描述的不大清楚。

我觉得你可以在皂化后,先用正已烷将胆固醇提取出来,再将正已烷挥干,然后用你的流动相去溶解就可以了。
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