主题:【已应助】请问单分子成像稀疏激活然后算SPF中心,怎么保证激活的就是单个荧光分子呢?

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请问单分子成像稀疏激活然后算SPF中心,怎么保证激活的就是单个荧光分子呢?
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李晓明老师回答:这个的话其实就是一个难点了。首先标记密度要合适,当然太高的标准密度也很难保证的。另外一个的话,一般我们其实经常会用两个模式,一个是用有荧光开关的荧光蛋白做,这个的话,不是特别的能够保证它的分辨率,就是不是特别能保证他的几乎都是单个荧光分子,但是制药比较容易。然后另外一个策略呢是我用不同的荧光对,比如说我是用 a荧光对去成像,然后b荧光对是可以激发荧光对。我先用一个荧光把 a荧光全部都淬灭,再用b荧光去用很低的亮度去激活某几个荧光分子,这样的话是可以在一定程度上起到低的激活密度的效果的。
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