主题:【求助】液相每一针保留时间都往前漂咋回事?

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lumanman
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流动相甲醇:pH7.0磷酸盐缓冲液(20mM)=56:44,提前混好,超声10min。柱温35度。柱子是新买的迪马的钻石2代。样品为生物样品,每一针保留时间都往前漂0.06min左右,进20多针会前移一分多钟,之前能分开的杂质峰,慢慢的跟主峰混到一起了。不知道这是咋回事?平衡时间都延长到2个小时了,还是如此。
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安平
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溶剂和其他组分的保留时间稳定否?

详细说说具体分析条件为好。梯度还是等度?


保留时间漂移可能与硬件有关,如果是,那么往往会伴随其他组分保留时间的不稳定,监视柱压力或流量,监视流动相的消耗情况都可以得知。

也可能与流动相有关,那么保留时间的漂移会与流动相冲过柱子的时间有关。

增大两次进样的时间间隔,如果保留时间仍旧发生预期的变化,那么应该是流动相问题。


也有可能问题来自样品,如果保留时间变化与进样次数相关,那么是样品问题。
lumanman
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单泵,等度洗脱,流动相提前配好的。溶剂峰稳的,其他组份的保留时间也在往前漂。
lumanman
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原文由 安平(byron1111) 发表:溶剂和其他组分的保留时间稳定否?详细说说具体分析条件为好。梯度还是等度?保留时间漂移可能与硬件有关,如果是,那么往往会伴随其他组分保留时间的不稳定,监视柱压力或流量,监视流动相的消耗情况都可以得知。也可能与流动相有关,那么保留时间的漂移会与流动相冲过柱子的时间有关。增大两次进样的时间间隔,如果保留时间仍旧发生预期的变化,那么应该是流动相问题。也有可能问题来自样品,如果保留时间变化与进样次数相关,那么是样品问题。
单泵,等度洗脱,提前混好的,溶剂峰保留时间基本上稳定,其他峰基本上都会往前漂
myoldid
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先测一下流动相的pH值,看看是否在柱子的耐受范围内?如果超出了柱子耐受范围就肯定不行了。没有超出的话可能是没有完全平衡好,需要更多的时间来平衡柱子。
另外可以监视一下系统压力是否稳定,把几个图的压力曲线重叠显示对比一下。
歪果仁zZ
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我认为这种问题是流动相purge不完全,管路里的流动相一直在变导致的。
Ins_d98a8f16
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有哪位大虾知道:火焰原子吸收执行点火,且点着火测试过程中会闻到乙炔气味,但是不执行点火,且把乙炔罐子打开没有闻到气温,这种情况下的乙炔泄露怎么解决?就是执行点火后测试过程中的乙炔泄露...
陈qq
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我认为两个原因,流动相可能没有混匀,或者系统中有气泡
牛一牛
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可以把压力曲线调出来对比一下,看一下压力曲线可以确认问题。
安平
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      流动相是混匀之后,单泵送液的么?


      可以考虑是否问题来自样品,生物样品中的杂质较多,容易积存在色谱柱内,影响色谱保留。

     
      可以改变进样的间隔,予以验证。

      例如第一次进样和第二次进样间隔时间30min,观察保留时间的变化程度。

        第二次进样和第三次进样间隔时间60min,

        多做几次,观察保留时间的变化程度,如果与进样次数明显相关,那么问题应该来自样品。
lumanman
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原文由 myoldid(v2963297) 发表:
先测一下流动相的pH值,看看是否在柱子的耐受范围内?如果超出了柱子耐受范围就肯定不行了。没有超出的话可能是没有完全平衡好,需要更多的时间来平衡柱子。
另外可以监视一下系统压力是否稳定,把几个图的压力曲线重叠显示对比一下。
pH7.0,柱子耐受pH为1.5-9.0。平衡时间应该差不多了,晚上用0.1ml/min平衡了9个小时,第二天早上再用1.0ml/min的流速平衡了40分钟。系统压力曲线也一直监控着,压力还是挺稳的。