主题:【第十四届原创】液相棘手问题之前延、拖尾、峰裂、峰宽汇总

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叮叮当当
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仪器信息网及各种相关仪器分析行业的网站上,经常有奇奇怪怪的液相难题,甚至让人直呼“邪门”,尤其让小白用户们心力交瘁,无从下手,其中最棘手的部分当属色谱峰,如无峰,鬼峰,前延峰,拖尾峰,峰裂,双峰,宽峰等等,本文针对这些最常见的问题,结合多年使用经验做以下总结,帮助用户快速锁定问题原因,并提供解决办法参考。



  • 无峰,一般是流动相或固定相组合不当引起,排查检测器进出口管路是否出液正常,提高流动相洗脱强度,实在无法解决,可以进样不保留的化合物看看情况,如果还不行就是仪器硬件问题。



  • 鬼峰,可能为以下原因:流动相污染,样品制备过程中污染,系统污染,色谱柱污染或之前用该柱的分析物未洗脱干净,流动相一定使用正规厂家正规渠道的溶剂,有不良商家自己灌装,用的瓶却是正规牌子货,普通人很难分辨,必要时可使用质谱级流动相。系统污染的话先跑空白溶剂,从后往前依次拆除系统的各个组件,查找原因。色谱柱污染的话可反冲,清洗筛板等,具体要咨询各家的应用工程师。



  • 前延,一般是色谱柱过载引起,更换柱长或内径更大的色谱柱,保证灵敏度前提下减少进样体积,还有情况就是色谱柱填料塌陷、沟流,需要更换。



  • 拖尾,排除共流出物分不开的原因后,硅胶类键合柱子容易出现此种情况,高温高pH易损害固定相,一定要在说明书规定的条件下使用,一般色谱柱温度不超过40度。另外,连接的管路过长也会造成拖尾,推荐使用内径0.12mm的红管,细短为佳。新柱也可能有质量问题,比如填料不均匀造成的空洞也会引起拖尾,但一般概率不大。



  • 裂峰或双峰,首先会想到样品溶剂与流动相不匹配造成的,即溶剂效应,尽量让样品溶剂与初始流动相保持一致。样品体积过载过浓度过大造成的平头峰,采样点控制的不好也会裂峰。有干扰组分,没分开或样品提取方法不合适,即样品处理条件和色谱条件都不成熟,这就需要再优化。色谱柱问题,如筛板堵塞或空洞,分析时尽量都带着保护柱。



  • 宽峰,进样体积过大或样品稀释太多太多次可造成宽峰。连接头未正确安装,管线太长或内径太粗造成的柱外体积增加也会引起峰加宽。梯度洗脱过程中,降低初始梯度,以进行峰聚集和浓缩,可以将峰变窄。

      以上,如有不当和补充欢迎评论交流,感谢阅读!

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总结的真好,希望仪器信息网能多来点这种干货,对我们刚入学的科研狗帮助太大了
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叮叮当当
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原文由 聪明草(Insp_6b7109a8) 发表:总结的真好,希望仪器信息网能多来点这种干货,对我们刚入学的科研狗帮助太大了
感谢您的支持
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很棒的分享,后面不需要额外附加文件,这样容易被抄袭。
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老师,我想问一下色谱峰出现大峰是主峰,后面紧跟着一个小峰是怎么回事
叮叮当当
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原文由 豆浆(Insm_1d77017b) 发表:老师,我想问一下色谱峰出现大峰是主峰,后面紧跟着一个小峰是怎么回事
物质难免有同分异构体,大概率是想分又分不开的同分异构体。