实战宝典 原创大赛 仪器问答 仪友会 总帖：8024236今日发帖：245 我的社区 签到
快速导航 采购仪器 提醒
液质联用（LCMS）
版主:
入住本版
专家:
居民列表

主题：【已应助】血浆乙腈沉淀蛋白质之后，空气吹干，底下有一层渣子附着在管壁，怎么复溶

浏览0 回复5 电梯直达
Ins_43fc623a
头像
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
发表于：2022/02/23 11:36:17 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
500微升血浆乙腈沉淀蛋白质之后，空气吹干，底下有一层渣子附着在管壁，怎么复溶才能把药物都溶解在溶液中，
为了浓缩药物，复溶液只能用250微升，这体积用什么合适，用的是反向色谱柱，
试了甲醇和乙腈，复溶的不够，回收率也差了
有什么办法吗
推荐答案：歪果仁zZ回复于2022/02/24
复溶的过程发生了二次蛋白沉淀。一定配比下，甲醇乙腈蛋白沉淀率虽然很高，但也是有限的，上清吹干再复溶的过程又将未沉淀完全的蛋白沉淀了一次，发生了浑浊，这样的现象很常见。一般需要再进行一次离心，小心取上层进样。如果回收率不高，考虑仔细考察目标物溶解最适宜的溶剂。因为液质检测灵敏度很高，没有文件规定回收率必须达到多少，只要低中高质控回收率保持稳定就可以，60-70%的回收率也挺常见。
该帖子作者被版主 hujiangtao加 5积分， 2经验，加分理由：鼓励发帖
为您推荐
近期热榜
热门活动
专属顾问快速对接
获取验证码
立即提交
相关阅读
hujiangtao
hujiangtao
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2022/2/23 15:24:30 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
如果目标物易溶于甲醇乙腈，250ul也够用了，回收率不好不一定是没溶解完全，也可能是基质效应的影响
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
xiaolanzi5
xiaolanzi5
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2022/2/23 18:33:30 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
能看到的渣子不一定是目标物。回收率不够不一定是复溶过程出的问题。氮吹过程，复溶溶剂的酸碱性，基质抑制等都会有影响。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
Ins_43fc623a
Ins_43fc623a
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2022/2/24 13:09:34 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由xiaolanzi5(xiaolanzi5)发表:能看到的渣子不一定是目标物。回收率不够不一定是复溶过程出的问题。氮吹过程，复溶溶剂的酸碱性，基质抑制等都会有影响。
怎么判断目标物的酸碱性呢，网上查也查不到，标液是用甲醇溶的，所以没用ph计，是通过结构式看吗
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
xiaolanzi5
xiaolanzi5
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2022/2/24 14:23:56 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 Ins_43fc623a(Ins_43fc623a) 发表:怎么判断目标物的酸碱性呢，网上查也查不到，标液是用甲醇溶的，所以没用ph计，是通过结构式看吗
在实际基质中该物质应该是羧酸的形式存在，而不是钠盐，结构中还含羟基，应该是酸性。可以查一下该物质pka，也能判断酸碱性。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
歪果仁zZ
v3255306
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2022/2/24 15:55:07 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
复溶的过程发生了二次蛋白沉淀。一定配比下，甲醇乙腈蛋白沉淀率虽然很高，但也是有限的，上清吹干再复溶的过程又将未沉淀完全的蛋白沉淀了一次，发生了浑浊，这样的现象很常见。一般需要再进行一次离心，小心取上层进样。如果回收率不高，考虑仔细考察目标物溶解最适宜的溶剂。因为液质检测灵敏度很高，没有文件规定回收率必须达到多少，只要低中高质控回收率保持稳定就可以，60-70%的回收率也挺常见。
赞贴
1
收藏
0
拍砖
0
举报
猜你喜欢 最新推荐 热门推荐
头像
高级回复 发表评论
品牌合作伙伴
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁