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液相色谱（LC）
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主题：【已应助】HILIC 色谱柱

浏览0 回复18 电梯直达
Ins_467b7d0d
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发表于：2022/03/14 17:54:02 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
最近想用Hilic柱子做有机酸，但是用梯度和等度都不出东西，感觉是完全没洗脱下来，但是水相已经升到60%了还是没有东西，可能是什么原因呢？
推荐答案：wuyuzegang回复于2022/03/15
可以参考一下安捷伦的方法看看
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xiaogumd11
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2022/3/15 9:52:24 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
参考资料：
前处理方法：金针菇加水匀浆，离心，过膜上机

流动相是ph2的0.02磷酸盐，柱是agilent SB-Aq 150×4.6 5um，0.4流速，210nm，标液酒石酸，苹果酸，柠檬酸，琥珀酸分别大概是5，6，8，9min出峰
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Ins_eedcdc41
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2022/3/15 9:55:57 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
有机酸是那些酸呢？不一定要用hilic，hilici只是针对你某些无保留化合物好使，且使用条件苛刻，优先考虑C18使用，我这边做的一些有机酸用C18跑的也挺好的
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wuyuzegang
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2022/3/15 9:56:06 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
可以参考一下安捷伦的方法看看
附件：
在Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z 色谱柱上分析有机酸.pdf
该帖子作者被版主 v3255306加 30积分， 2经验，加分理由：优质回答
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Ins_467b7d0d
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2022/3/15 9:57:42 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 歌名(Ins_eedcdc41) 发表:
有机酸是那些酸呢？不一定要用hilic，hilici只是针对你某些无保留化合物好使，且使用条件苛刻，优先考虑C18使用，我这边做的一些有机酸用C18跑的也挺好的
是一些葡萄糖酸、苹果酸、柠檬酸等，想做一下定量，但是C18出峰都太早了，不太能分开
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2022/3/15 10:01:23 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 wuyuzegang(dahua1981) 发表:
可以参考一下安捷伦的方法看看
好多方法都试过了，之前提取离子定量测糖还可以出峰，做有机酸的时候从来都没有出过峰
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检测老菜鸟
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2022/3/15 10:10:06 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
用的流动相pH是多大的？酸？中性？
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检测老菜鸟
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2022/3/15 10:10:45 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
别到时候成盐给柱子堵了还在走？先确定下方法吧
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歌名
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2022/3/15 10:15:27 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 Ins_467b7d0d(Ins_467b7d0d) 发表:
是一些葡萄糖酸、苹果酸、柠檬酸等，想做一下定量，但是C18出峰都太早了，不太能分开
你是做LCMS还是做LC？？？做LC试着添加10mM三乙胺，
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Ins_467b7d0d
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2022/3/15 10:17:44 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 歌名(Ins_eedcdc41) 发表:
你是做LCMS还是做LC？？？做LC试着添加10mM三乙胺，
做LCMS定量
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wuyuzegang
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2022/3/15 10:18:29 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 Ins_467b7d0d(Ins_467b7d0d) 发表:
好多方法都试过了，之前提取离子定量测糖还可以出峰，做有机酸的时候从来都没有出过峰
标准品不出峰？
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