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主题：【已应助】层析柱尺寸对反相层析的影响

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发表于：2022/05/11 13:43:30 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
各位大神，蛋白纯化时层析柱尺寸如何影响反相层析的规模和柱效的？请各位大神给详细介绍一下。
推荐答案：123回复于2022/05/11
在柱长固定的情况下，内径决定了柱体积，RPC在放大层析规模时，都是在优化好层析条件后，固定柱长不变，增大层析柱内径来放大。
反相介质粒径普遍较小，本身有着较高的柱效，一般所用层析柱柱长较短
对于寡肽等生物小分子，适当增加柱长能够改善Rs
生物大分子在反相柱中的保留值对于流动相的微小变化十分敏感，可以认为是由开/关机制控制，增加柱长不能明显改善Rs
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2022/5/11 15:54:02 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
在柱长固定的情况下，内径决定了柱体积，RPC在放大层析规模时，都是在优化好层析条件后，固定柱长不变，增大层析柱内径来放大。
反相介质粒径普遍较小，本身有着较高的柱效，一般所用层析柱柱长较短
对于寡肽等生物小分子，适当增加柱长能够改善Rs
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2022/5/11 16:02:36 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
去看下柱效计算公式就知道了，一定条件下，层析柱直径越大，柱效越低，直径越小，柱效越高；一定条件下，层析柱载样量只跟填料量相关（载体），填料多，载量大，填料少，载量少，但是填料多势必增大柱体积；工业一般追求高通量、高柱效，所以公司里面做蛋白的层析柱一般都是高，但不要一定细，要看工艺要求，想简单的G25一般1.4m高，直径20cm左右算是比较大的了，像脱热源的而一些柱子直径可能就是5cm左右，高度也能达到0.8-1.3m左右，就是要在满足柱效要求前提下尽可能的增大通量，提高生产效率
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