实战宝典 原创大赛 仪器问答 仪友会 总帖：8034772今日发帖：33 我的社区 签到
快速导航 采购仪器 提醒
液质联用（LCMS）
版主:
入住本版
专家:
居民列表

主题：【已应助】流动相加酸、加碱、加盐的目的

浏览0 回复5 电梯直达
Ins_64fa449e
头像
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
发表于：2022/06/08 15:46:45 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
流动相里加酸、加碱、加盐的目的是啥呀，一个物质怎么确定是酸性还是碱性的呀，加酸、加碱和加盐有限制只是为了保护整个系统吗，酸碱盐的类型是根据检测物质的性质来选的吗，有何规律吗，
推荐答案：hujiangtao回复于2022/06/08
待测物酸碱性可通过pKa值查询，流动相中含水部分的pH是影响离子型化合物的解离状态和色谱保留的重要参数，不同形态的保留随着pH的改变而明显不同，但对非极性较强或中性化合物影响不明显。在反相色谱中，控制pH会对化合物的保留带来最显著的变化。化合物从离子状态变化到非离子状态其保留因子可变化10～30倍，因此，pH是方法开发时最强有力的选择性调节工具。
对于大多数碱性化合物和一般的弱酸，采用低pH流动相（流动相加甲酸或乙酸）能使碱性化合物在硅胶基色谱柱上获得更好的峰形，大多数反相柱都可以在pH 2～8条件下使用。在低pH条件下，硅胶的硅醇基完全质子化，所以与带正电荷的碱性化合物的相互作用较弱，从而得到良好的峰形。对于酸性化合物来说，在低pH下不带电荷，可使其保留最大；而一些样品可能在低pH条件下无法分离，但在中等pH条件下具有更好的溶解度和稳定性。在中等pH范围内，碱性化合物（如胺类）可能仍带正电荷，而硅醇基则可能带负电荷，正负电荷之间的次级作用会影响碱性化合物的峰形。因此可以选择封端的色谱柱来屏蔽硅醇基。通常，pH 7时流动相添加剂可选择LC/MS兼容的挥发性乙酸铵或甲酸铵。在低pH或中等pH条件下，某些碱性化合物可能仍然没有足够的保留和选择性，这时可尝试使用更高的pH条件下（流动相加氨水）进行分离。因为在高 pH 条件下碱性化合物呈非解离状态，可以增加其保留。
该帖子作者被版主 hujiangtao加 5积分， 2经验，加分理由：鼓励发帖
为您推荐
近期热榜
热门活动
您可能想找: 液质联用(LC-MS) 询底价
选参数 看心得 找厂商 查方案
专属顾问快速对接
立即提交
可能感兴趣
wuyuzegang
dahua1981
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2022/6/8 16:26:43 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
1、改善峰形，某些样品不加酸液相不出峰的，有些样品加了酸之后峰形会变的好一些，但是要看具体情况，也有一些样品加了酸之后反而峰形变差。
2、调整保留时间，改善分离度。
3、保护色谱柱，分析某些PH过高或者过低的样品的时候
总的来说都是为了峰形，峰位。根据药物 自身的酸碱性，选择合适PH，对于反相来说，一般情况下，样品在分子状态下保留比较好，样品在色谱柱上的保留程度直接影响的就是峰形和峰位了。
赞贴
1
收藏
0
拍砖
0
举报
2022/6/8 16:27:31 Last edit by dahua1981
hujiangtao
hujiangtao
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2022/6/8 16:44:01 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
待测物酸碱性可通过pKa值查询，流动相中含水部分的pH是影响离子型化合物的解离状态和色谱保留的重要参数，不同形态的保留随着pH的改变而明显不同，但对非极性较强或中性化合物影响不明显。在反相色谱中，控制pH会对化合物的保留带来最显著的变化。化合物从离子状态变化到非离子状态其保留因子可变化10～30倍，因此，pH是方法开发时最强有力的选择性调节工具。
对于大多数碱性化合物和一般的弱酸，采用低pH流动相（流动相加甲酸或乙酸）能使碱性化合物在硅胶基色谱柱上获得更好的峰形，大多数反相柱都可以在pH 2～8条件下使用。在低pH条件下，硅胶的硅醇基完全质子化，所以与带正电荷的碱性化合物的相互作用较弱，从而得到良好的峰形。对于酸性化合物来说，在低pH下不带电荷，可使其保留最大；而一些样品可能在低pH条件下无法分离，但在中等pH条件下具有更好的溶解度和稳定性。在中等pH范围内，碱性化合物（如胺类）可能仍带正电荷，而硅醇基则可能带负电荷，正负电荷之间的次级作用会影响碱性化合物的峰形。因此可以选择封端的色谱柱来屏蔽硅醇基。通常，pH 7时流动相添加剂可选择LC/MS兼容的挥发性乙酸铵或甲酸铵。在低pH或中等pH条件下，某些碱性化合物可能仍然没有足够的保留和选择性，这时可尝试使用更高的pH条件下（流动相加氨水）进行分离。因为在高 pH 条件下碱性化合物呈非解离状态，可以增加其保留。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
123
m3149125
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2022/6/8 19:00:55 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一个是对峰型有影响，如果pH值选的不好，色谱峰会出现大拖尾。
一个是对保留时间的影响。如果待测物质是中性的，那么pH值就没什么影响。不过如果待测物本身有酸碱性，那么影响就比较大了。比如说，一个碱性物质，流动相的pH值越小（就是流动相酸性越大），样品的保留时间越往前移。
一般流动相的pH值是根据样品的pKa值或者pKb值来确定的。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
Ins_64fa449e
Ins_64fa449e
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2022/6/9 8:56:54 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 hujiangtao(hujiangtao) 发表:
待测物酸碱性可通过pKa值查询，流动相中含水部分的pH是影响离子型化合物的解离状态和色谱保留的重要参数，不同形态的保留随着pH的改变而明显不同，但对非极性较强或中性化合物影响不明显。在反相色谱中，控制pH会对化合物的保留带来最显著的变化。化合物从离子状态变化到非离子状态其保留因子可变化10～30倍，因此，pH是方法开发时最强有力的选择性调节工具。
对于大多数碱性化合物和一般的弱酸，采用低pH流动相（流动相加甲酸或乙酸）能使碱性化合物在硅胶基色谱柱上获得更好的峰形，大多数反相柱都可以在pH 2～8条件下使用。在低pH条件下，硅胶的硅醇基完全质子化，所以与带正电荷的碱性化合物的相互作用较弱，从而得到良好的峰形。对于酸性化合物来说，在低pH下不带电荷，可使其保留最大；而一些样品可能在低pH条件下无法分离，但在中等pH条件下具有更好的溶解度和稳定性。在中等pH范围内，碱性化合物（如胺类）可能仍带正电荷，而硅醇基则可能带负电荷，正负电荷之间的次级作用会影响碱性化合物的峰形。因此可以选择封端的色谱柱来屏蔽硅醇基。通常，pH 7时流动相添加剂可选择LC/MS兼容的挥发性乙酸铵或甲酸铵。在低pH或中等pH条件下，某些碱性化合物可能仍然没有足够的保留和选择性，这时可尝试使用更高的pH条件下（流动相加氨水）进行分离。因为在高 pH 条件下碱性化合物呈非解离状态，可以增加其保留。
我看到有人说碱性物质，流动相就加碱，酸性物质，流动相就加酸，是这样吗
赞贴
1
收藏
0
拍砖
0
举报
hujiangtao
hujiangtao
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2022/6/9 15:33:56 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 Ins_64fa449e(Ins_64fa449e) 发表: 我看到有人说碱性物质，流动相就加碱，酸性物质，流动相就加酸，是这样吗
不是这么绝对的，保证峰型的情况下偏碱性的物质加酸有利于离子化，偏酸性物质相反。要综合响应值和峰型保留时间确定
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
猜你喜欢 最新推荐 热门推荐
头像
高级回复 发表评论
品牌合作伙伴
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁