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主题：【已应助】液相色谱，溶液配制可不可以不经过稀释？

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guoguoguog
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发表于：2022/06/13 16:38:31 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊

这个是吡虫啉原药的国标标准的溶液配制这一步，可不可以不经过稀释，直接用100ml甲醇稀释过后的溶液进行检测
推荐答案：hnteng回复于2022/06/16
  如果你是检测单位，要对客户负责，你就必须按国标一步步来。不按国标，你的检测没有法律效力。
  如果你只是研究，按不按国标，没关系，可以自己建方法。
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dahua1981
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2022/6/13 19:16:04 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不一定非要使用流动相稀释，甲醇应该也可以，主要看测的什么物质。但是用流动相稀释样品主要是为了提高分离度，增加理论塔板数，使峰形尖锐，对称。具体理由如下：
色谱法的实质是样品在流动相与固定相之间反复分配的过程,这个过程在实际中会受到很多因素的影响从而造成分离度下降,理论塔板数降低,使得分离不理想.
根据液相色谱Van Deemter方程H = A  Cμ（A为涡流扩散系数，C为传质阻抗系数，μ为流动相流速）。
涡流扩散主要由色谱柱本身造成。
传质阻抗是阻碍组分分子在固定相和流动相之间达到平衡需要进行分子的吸附、脱附、溶解、扩散等过程的因素。在理想状态中，色谱柱的传质阻抗为零，则组分分子流动相和固定相之间会迅速达到平衡，在实际体系中传质阻抗不为零。用流动相溶解稀释样品，是为了减少传质阻抗，提高分离塔板数，使得峰尖锐，对称。
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2022/6/13 19:19:05 Last edit by dahua1981
xiaolanzi5
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2022/6/13 20:41:02 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
稀释后浓度约为100ppm，不稀释就是1000ppm，1000ppm直接进样浓度是不是有点高，有时浓度太高会把小杂质峰包在里面，不利于定量。
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myoldid
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2022/6/14 11:55:41 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
吡虫啉的响应很高的，1mg/mL的吡虫啉，不稀释，进5uL时就接近响应上限了，所以还是老老实实的稀释吧
下图是0.4mg/mL，进5uL的谱图，如果是1mg/mL，响应就太高了
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hnteng
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2022/6/16 11:46:36 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
  如果你是检测单位，要对客户负责，你就必须按国标一步步来。不按国标，你的检测没有法律效力。
  如果你只是研究，按不按国标，没关系，可以自己建方法。
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