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主题：【已应助】怎么分离杂质跟目标物质

浏览0 回复14 电梯直达
古代的月亮
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发表于：2022/06/22 18:48:00 楼主 管理 分享 倒序浏览 查看全部 回复 私聊
我的流动相A 甲醇+B 1%乙酸水。图一（上为标准品，图下为加标）等度洗脱，A:B=1:1。图2（上为样品，下为加标）等度洗脱，比例是A:B=80:20，这时候分的不是分好，但是能看出来分开了，所以试了A:B=90:10,A:B=70:10,效果都不好。图3（上为加标，下为标准品）梯度洗脱，0-2min,A 50%;2-3min,A 90%;3-7min,A 90%;7.1-10min,A 50%。最终分离的效果都不好，想问下大神的建议。顺便问下调整流动相的规律是什么，在一个未知物面前，怎么调整流动相比例，快速找到目标峰，然后如何将目标峰与杂质分开呀，感觉很多时候等度不太行，改变流动相比例，目标峰是变了，但是杂质峰跟着一起变。很多文献说梯度洗脱可以去除杂质，但是我不太会，望大神给予经验，谢谢。
图1

                                                                                                                                             
推荐答案：hujiangtao回复于2022/06/22
分离效果不好的时候梯度洗脱程序变化速率缓慢一些
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检测老菜鸟
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2022/6/23 8:35:51 沙发 管理 分享 倒序浏览 查看全部 回复 私聊
）梯度洗脱，0-2min,A 50%;2-3min,A 90%;3-7min,A 90%;7.1-10min,A 50%。
你这个思路是错的。2分钟的梯度是不行的。一般试方法，像出峰这么近的，可以再低一些有机相，比如20，30之类的。然后最好是1min10%浓度梯度或者更低到你的目标梯度。

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检测老菜鸟
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2022/6/23 10:16:17 板凳 管理 分享 倒序浏览 查看全部 回复 私聊
原文由 古代的月亮(Ins_64fa449e) 发表:
好的，我试了0-3min,A 20%,8min,A50%,10min,A50%,12.1min,A90%,15min,A90%,15.1min,A20%,18min,A20%。这样跑完还是不行，你有啥好的建议吗
                                                                                                                                       
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