原文由 wuyuzegang(dahua1981) 发表:好的,受教
秘诀1: 由强到弱: 一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验, 这样可以很快地得到分离结果,然后根据出峰情况调整有机溶剂(乙腈或甲醇)的比例。
秘诀2 三倍规则 :每减少10%的有机溶剂(甲醇或乙腈)的量,保留因子约增加3倍,此为三倍规则。这是一个聪明而又省力的办法。调整的过程中,注意观察各个峰的分离情况。
秘诀3 粗调转微调:当分离达到一定程度,应将有机溶剂10%的改变量调整为5%,并据此规则逐渐降低调整率,直至各组分的分离情况不再改变。
先100%的有机溶剂,在降下来。因为有些分离96%即可分离
原文由 检测老菜鸟(v3295053) 发表:好的,我试了0-3min,A 20%,8min,A50%,10min,A50%,12.1min,A90%,15min,A90%,15.1min,A20%,18min,A20%。这样跑完还是不行,你有啥好的建议吗
)梯度洗脱,0-2min,A 50%;2-3min,A 90%;3-7min,A 90%;7.1-10min,A 50%。
你这个思路是错的。2分钟的梯度是不行的。一般试方法,像出峰这么近的,可以再低一些有机相,比如20,30之类的。然后最好是1min10%浓度梯度或者更低到你的目标梯度。