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液相色谱（LC）

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主题：【已应助】正相色谱柱柱效降低

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Ins_91417472

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发表于：2022/08/08 13:02:37 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

正相色谱柱使用一段时间后，他的拖尾因子就从1.2左右到了2.0，峰型变得很不好看，是柱子没有保存好嘛？使用的流动相是正己烷：异丙醇：三氟乙酸=850：150：1，使用完后会用正己烷和异丙醇冲洗，保存在高正己烷中，还请大家教教我

推荐答案：安平回复于2022/08/08

楼主具体使用什么型号的色谱柱？详细说明具体情况为好。

有些正相色谱柱，是不可以通过大量水的。

楼主具体分析什么样品？具体使用什么分析条件？详细说明为好。

如果是硅胶正相柱，可以考虑提高流动相中的异丙醇比例进行清洗。

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wuyuzegang

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2022/8/8 13:42:19 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

可以重生一下试试
顺次以正己烷、异丙醇、二氯甲烷、甲醇作流动相冲洗色谱柱。每步注意平衡溶剂的顺序，不要颠倒。每种流动相流经色谱柱的量为20-30倍柱体积(因异丙醇的粘度较大，冲洗过程中请注意调整冲洗的流速)，用甲醇冲洗完后，再以相反的顺序冲洗色谱柱。要注意上述溶剂必需严格脱水。另外，请清洗前严格熟读色谱柱说明书，了解哪些溶剂不可用。

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2022/8/8 14:55:27 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

如果色谱柱柱效出现大幅下降，且柱效下降可能由于强保留物质聚积所导致时，使用如下试剂依次清洗色谱柱

　　20倍柱体积正己烷；

　　20倍柱体积异丙醇；

　　20倍柱体积乙腈；

　　20倍柱体积水；

　　20倍柱体积乙腈；

　　20倍柱体积异丙醇；

　　20倍柱体积正己烷。
正相相色谱柱，保存溶剂通常是含乙醇的正己烷，也可在常规清洗后直接保存在乙醇中，切岂保存在含纯水的流动相中，这将导致色谱柱性能的迅速下降

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