快速导航采购仪器提醒

液质联用（LCMS）

版主:

入住本版

专家:

仪器信息网

居民列表

仪器社区 > 质谱 > 液质联用（LCMS）帖子详情

快速回复发表新帖最新帖

主题：【已应助】β—受体激动剂检测内标回收不正常

浏览0 回复12 电梯直达

Ins_f58a9817

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

发表于：2022/08/25 09:34:02 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

同志们我又来求助了

，公司新项目让检测动物源性中的激动剂，使用的国标是GB/T22286-2008,检测主要成分是沙丁胺醇，克伦特罗，莱克多巴胺。使用的是Waters tq-s步骤完全按照国标做的，但内标回收一直不行，很低，导致校正后的结果非常大，差不多400%

下面压缩文件里是内标图，使用的是溶剂标，有没有哪位同志遇到过相同的请况，请大神们指点迷津

推荐答案：hujiangtao回复于2022/08/25

这个方法外标回收不高，如果内标加入不够准确的话很容易导致回收校准偏高。“1000ppb加了5ul”体积有点少了，我一般加至少20uL以上，一般50uL比较合适。我们用农业部1025-18号公告内标法做这三种回收基本都在100~110%之间很稳定的，该标准也是定容到200uL，不过现在仪器灵敏度高了，定容到1mL完全没问题。楼主可以试一下配制100ppb的标样和内标的中间液，然后加50uL，这样上机浓度也是5ppb，再做一下看回收率

该帖子作者被版主 hujiangtao加 5积分， 2经验，加分理由：鼓励发帖

1
赞贴
12
回帖
0
收藏
0
拍砖
版主
招募

为您推荐

近期热榜

热门活动

专属顾问快速对接

获取验证码

立即提交

相关阅读

Ins_f58a9817

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2022/8/25 9:37:06 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

想了很长时间就是找不到哪里的步骤做错了

赞贴

拍砖

歌名

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2022/8/25 9:44:39 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

18年做的时候刚开始做激动剂，我记得回收率差不多70-80%的样子，回收率的话只要还是看你的前处理，但是你的回收率偏离这么大我是建议审查一下你的内标添加量和计算方式是不是有误哈

赞贴

拍砖

Ins_f58a9817

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2022/8/25 10:36:23 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 歌名(Ins_eedcdc41) 发表:18年做的时候刚开始做激动剂，我记得回收率差不多70-80%的样子，回收率的话只要还是看你的前处理，但是你的回收率偏离这么大我是建议审查一下你的内标添加量和计算方式是不是有误哈

标准上最后定容体积是0.2ml，仪器吸不到就改为定容为1ml，内标是1000ppb加了5ul

赞贴

拍砖

Ins_f58a9817

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2022/8/25 10:37:24 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 Ins_f58a9817(Ins_f58a9817) 发表:标准上最后定容体积是0.2ml，仪器吸不到就改为定容为1ml，内标是1000ppb加了5ul

是不是定容体积变动的太多了

赞贴

拍砖

hujiangtao

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2022/8/25 10:43:52 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

赞贴

拍砖

m3321930

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2022/8/25 12:07:34 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

内标加5ul，移液枪误差可能会有一点的。22286这个标准，需要酶解的，酶解效果比不酶解效果好很多的。

赞贴

拍砖

歌名

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2022/8/25 14:57:10 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 Ins_f58a9817(Ins_f58a9817) 发表:
标准上最后定容体积是0.2ml，仪器吸不到就改为定容为1ml，内标是1000ppb加了5ul

“标准上最后定容体积是0.2ml，仪器吸不到就改为定容为1ml”------------------------用内插管就可以了，
“内标是1000ppb加了5ul”---------------------------------------------------添加体积的话控制在25-5ul是比较合适，我这边的话一般20/15ul用的多，22286我记得是10ng/ml-------100ul，从这个添加量来说你添加的内标量应该是没啥问题的（前提是前面做方法验证的时候这个浓度在你实验室稳定性没问题哈），但其实只要标液、样品和软件设置保持一致都问题不大

赞贴

拍砖

Ins_f58a9817

结帖率：

100%

关注：0 |粉丝：0

新手级：新兵

2022/8/25 16:23:57 8楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 hujiangtao(hujiangtao) 发表:这个方法外标回收不高，如果内标加入不够准确的话很容易导致回收校准偏高。“1000ppb加了5ul”体积有点少了，我一般加至少20uL以上，一般50uL比较合适。我们用农业部1025-18号公告内标法做这三种回收基本都在100~110%之间很稳定的，该标准也是定容到200uL，不过现在仪器灵敏度高了，定容到1mL完全没问题。楼主可以试一下配制100ppb的标样和内标的中间液，然后加50uL，这样上机浓度也是5ppb，再做一下看回收率

内标是在酶解后加的吗？

赞贴

拍砖