主题：【第十五届原创】提高农药残留检测能力验证通过率之我见

提高农药残留检测能力验证通过率

之我见

能力验证是指利用实验室间比对,按照预先制定的准则评价参加者的能力。能力验证是反映实验室质量管理体系有效性的重要手段,对实验室中隐藏的风险有预测和预警的作用。通过参加能力验证活动可识别实验室的质量管理水平,发现存在的管理盲区,提高检测技术水平和效率,保证检测结果准确、可靠。

为提高检测技术水平，本实验室自2012年以来一直自愿参加农业农村部农产品农药残留检测全部项目的能力验证工作，经历了从真值法到Z值法考核方法的转变，考核难度也逐年提高的情况下都顺利通过了能力验证。现以2020年农药残留检测能力验证工作为例，解析参加能力验证活动的方法和步骤，总结经验教训，提高农产品检测实验室能力验证的水平和通过率。

1、基本情况

此次能力验证同样参加了全部项目80种农药，包括10种农药残留代谢物，共计90种参数。本次能力验证发放的样品为已破碎的结球甘蓝和桃两个样品,其中每个品种1盒空白样品、1盒考核样品,每盒样品大约150g。样品通过快递方式送达，接受样品后需在96小时内在验证平台上报检测结果，并邮寄检测原始记录。系统推荐了标准检测方法并允许自行选择方法。结果判定标准为Z值法，初次验证不合格还可以参加一次补验。

推荐检测方法：

1、 NY/T761-2008《蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留检测方法》

2、 GB 23200.113-2018《植物源性食品中208种农药及其代谢物残留量的测定 气相色谱-质谱联用法》

3、 GB/T20769-2008《水果和蔬菜中450种农药及相关化学品残留量的测定-液相色谱串联质谱法》

2020年农药残留检测能力验证一次性通过

2、能力验证前期准备工作

2.1人员  由于中心领导重视，检验一科所有检测人员都积极参加此次能力验证工作。每一项工作至少有两三人协同完成。主要和关健步骤都是由同一人操作,检测全过程及关键步骤都有另一人监督和确认。遇到疑问沉着应对、团结协作、群策群力。

2.2仪器设备  仪器设备都是检定合格设备。经过精心维护、调试到最佳状态,保证检测仪器稳定、响应好。由于检测仪器充足，基本上做到了每一个检测项目都有两台以上的检测仪器之间做比对，每一台检测仪器都做了人员间比对。

2.3标准物质  能力验证最关键的就是标准物质要准确、稳定，能力验证前及时向农业农村部环境保护科研监测所采购新的标准物质,并配成单标和混标,上机检测测试。做到了标准物质有证、同源且量值准确、稳定。

2.4试剂、器皿的处理  对检测中使用的容量瓶、移液管、量筒、具塞刻度试管等进行检定或校准。玻璃器皿清洗后再用丙酮清洗一遍,晾干备用，做到器皿间不互相污染。实验所使用的试剂如乙腈、丙酮,正己烷,甲醇和乙酸铵等全部用色谱纯级别的，并且是新开瓶的，同时做试剂空白试验。水是用屈臣氏的蒸馏水。

2.5准备考核样空白基质  在确定组织方采用哪种蔬菜水果作为考核基质时,应提前准备不含农药残留的相同蔬菜水果作为基质进行添加回收实验。

2.6加标回收实验  通过加标回收实验,确保仪器设备、标准物质、检测方法等检测全过程不出现问题，并且摸清楚每个农药参数在基质上的基质效应和回收率情况。一旦出现回收率不合理现象时查找其中原因并进行纠正处理,多做练习才能做到心中有底。

3、能力验证检測基本流程

3.1领回考核样品后静置一段时间，待样品化冻后搅拌均匀，空白样和考核样都准确称取15.0克到100ml的离心管里，共10管备用。

3.2分别取两个空白样和两个考核样进行前处理(其余的考核样放冰箱冷冻)，配制20ppb（液相）、100ppb(气相)的基质混标上机检测，进行初步定性和定量(已知空白样中检测到的农药参数在考核样中不会添加)。把定性后的参数以及有怀疑的参数留下来再重新检测一次，提高初次定性定量的准确性。

3.3根据初次定性定量结果，再参考各个检出参数加标回收试验的回收率，以校正后的值作为预估值作为基质标准曲线和质控（QC）添加的中位值，其低位值和高位值一般为中位值的一半和一倍。

3.4配制好检出参数混标（各参数浓度不同），根据上一步设计好的质控（QC）添加浓度点分别添加到称好的空白样中（高、中、低三个点各一个），再把添加好的质控样冰冻一晚（或12小时），尽量做到跟考核样品处于相同状态。

3.5取冷冻好的质控添加样和3个考核样（三个平行样）以及两个空白样解冻后进行前处理，所有前处理过程尽量做到一致。用前处理过后的空白基质液配制基质标准曲线（高、中、低三个浓度点），并上机检测。

3.6参考质控样各个浓度点的回收率，在80%~120%允许范围内, 证明前处理过程操作准确,结果可靠,可上报检测结果。同时根据回收率的多少决定对考核样检测值校正与否。如液相方面，甲胺磷、氧乐果、灭蝇胺、霜霉威等加标回收率在60%~70%左右，所以要上报校正值。

4、前处理关键点控制技巧

4.1 前处理优化
    推荐的三个标准检测方法前处理过程繁琐、步骤冗长，容易操作不当增加系统误差，为减少前处理步骤，我们选用QuECHERS方法来优化前处理过程。

步骤如下：15.0g样品中准确添加30.0ml 乙腈

→匀浆1分钟

→加6g氯化钠

→再匀浆1分钟

→4000转/分离心5分钟后取上清液备用。

液相方面是用2ml的注射器取2ml上清液加QuECHERS粉末净化，再过0.2um微孔滤膜直接上机；

气相方面是用5ml的注射器取5ml上清液加QuECHERS粉末净化，再取4ml净化液氮吹至近干，用1:1的丙酮正己烷定容到2ml，过膜上机。

4.2前处理注意点
    样品在前处理过程中需要注意以下几点:

①匀浆时匀浆机要缓慢匀速调整到高速，最好是用同1台匀浆机。匀浆过程中不能洒出样品;

②移液过程要准确，同一人操作做到样品间无差别;

③氮吹时，样品间气体流速一致，氮吹浓缩条件一致;氮吹过程中，需有试验人员看管，在液体近干时要保留一滴液体，保证试管底部不能完全干燥，否则会使回收率偏低。

5、 总结

综上所述，农药残留能力验证实验的关键技术是:

1、对能力验证计划制定相应的作业指导书，对参加能力验证过程的人员严格管理，校准试验过程中使用的体积计量仪器，使用色谱级试剂，并在仪器上进行试剂空白试验;

2、在测量前将仪器调整到最佳工作状态，增加灵敏度，保持仪器稳定性。适当改变色谱柱条件、调整流速，避免基质中共流物干扰，让不同的农药完全分离并保持良好的峰形;

3、在试验过程中应进行严格的质量控制，并应采用与能力验证相同的试样进行加标回收试验。根据分析结果，验证测量结果的准确性。

能力验证作为实验室质量控制的重要手段,实验室所有人员应高度重视,积极做好前期准备工作,加强技术练兵。发现问题后要认真分析原因,制定整改计划,完成整改措施,增强实验室的检测能力。