为了探究SiO₂-[P_888Allyl]Br色谱柱的分离性能，首先测试了SiO₂-[P_888Allyl]Br色谱柱对核苷/核酸碱基类物质的分离效果。如图所示，使用90% ACN/10% H₂O作为流动相进行洗脱，在6.0分钟内尿嘧啶、尿苷、腺苷、胞苷和胞嘧啶可以达到基线分离（图a）。五种物质的理论塔板数均在50,000 N/m以上。此外，五种物质的峰形良好，拖尾因子分别为1.16、1.15、1.09、1.14和1.12。在相同的色谱分离条件下，采用商品化SiO₂-NH₂柱对五种物质进行分离，结果显示，商品化SiO₂-NH₂柱对亲水性核苷/核酸碱基类化合物有更强的保留，需要在18.0分钟内才可以将五种化合物完全分离（图b）。在SiO₂-[P_888Allyl]Br色谱柱上亲水性核苷/核酸碱基的保留相对较弱，这与SiO₂-[P_888Allyl]Br色谱柱的中等亲水特性相一致。调节流动相的比例，当流动相的比例调节至81% ACN/19% H₂O时，在SiO₂-NH₂柱上五种物质保持时间与其在SiO₂-[P_888Allyl]Br色谱柱中保留时间相近，但是尿苷（峰2）和腺苷（峰3）完全重叠在一起，不能达到基线分离（图c）。因此，所制备的SiO₂-[P_888Allyl]Br色谱柱可以在较短的时间内实现对核苷/核酸碱基类化合物的高选择性分离。

图核苷/核酸碱基类物质在SiO₂-[P_888Allyl]Br色谱柱（a）和SiO₂-NH₂柱（b，c）中的分离谱图

SiO₂-[P_888Allyl]Br色谱柱分离磺胺类化合物

选取磺胺二甲基嘧啶、磺胺嘧啶、磺胺胍、乙酰唑胺和磺胺噻唑五种亲水性的磺胺类化合物，进一步考察了SiO₂-[P_888Allyl]Br色谱柱的分离性能。以乙腈/水（97/3，v/v）为流动相，五种磺胺类化合物在5.0分钟可以达到基线分离（图a），最高柱效达到67,300 N/m（峰2）。五种磺胺类化合物的拖尾因子在1.07-1.33，其分离度分别为2.35、1.78、3.92和3.07。在相同的色谱分离条件下，商品化SiO₂-NH₂柱不能实现五种化合物的完全分离，磺胺嘧啶（峰2）和磺胺胍（峰3）的分离度仅0.84，且分离时间延长至了25 min（图2b）。如图c所示，将流动相中乙腈/水的比例降至92/8，上述五种分析物从色谱柱中洗脱出的总时间与图a相似，尽管磺胺嘧啶（峰2）和磺胺胍（峰3）可实现完全分离，但磺胺胍（峰3）和乙酰唑胺（峰4）的峰重叠，无法实现分离。上述结果进一步证明了SiO₂-[P_888Allyl]Br色谱柱对亲水性磺胺类化合物具有较高的分离选择性。

图磺胺类物质在SiO₂-[P_888Allyl]Br色谱柱（a）和SiO₂-NH₂柱（b，c）中的分离谱图

色谱条件：图a和b流动相为乙腈/水（97/3，v/v），图c流动相为乙腈/水（92/8，v/v）；

SiO₂-[P_888Allyl]Br色谱柱分离酰胺类化合物

另一方面考察SiO₂-[P_888Allyl]Br色谱柱对硫代乙酰胺、2-碘乙酰胺、对氨基苯甲酰胺和烟酰胺的分离选择性。图所示，四种酰胺类化合物在乙腈/水（97/3，v/v）为洗脱液时在6.0 min内即可达到共洗脱，且具有良好的峰形和理论塔板数，最高理论塔板数为109,700 N/m，拖尾因子在0.99-1.10之间。