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主题：【已应助】相同梯度，3针之间出峰延迟，峰间隔增加

浏览0 回复6 电梯直达
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发表于：2022/12/20 15:26:58 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
为什么呢？怎么保证重现性呢？
是不是和流动相关系最大？
流动相：水（0.1%FA+5mM乙酸铵）-乙腈（0.1%FA）
推荐答案：hujiangtao回复于2022/12/20
这个流动相体系应该挺稳定的，UPLC柱的保留时间重现性很好，如果是普通色谱柱可能保留时间重现性稍微差一些
该帖子作者被版主 hujiangtao加 5积分， 2经验，加分理由：鼓励发帖
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2022/12/20 17:16:45 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这个流动相体系应该挺稳定的，UPLC柱的保留时间重现性很好，如果是普通色谱柱可能保留时间重现性稍微差一些
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2022/12/20 22:42:42 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
乙酸铵是不是现配的？乙腈是不是新鲜的？每针进样前初始流动相平衡时压力有没有大的变化？
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2022/12/21 12:48:15 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 hujiangtao(hujiangtao) 发表:
这个流动相体系应该挺稳定的，UPLC柱的保留时间重现性很好，如果是普通色谱柱可能保留时间重现性稍微差一些
用的Zorbax SB-Aq柱
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2022/12/21 12:49:32 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 xiaolanzi5(xiaolanzi5) 发表:
乙酸铵是不是现配的？乙腈是不是新鲜的？每针进样前初始流动相平衡时压力有没有大的变化？
都是当天早上配的。压力倒没有很大的变化，但是我是梯度前后都平衡1.5min，如果少了峰就明显变得很丑
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2022/12/21 17:23:03 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 hujiangtao(hujiangtao) 发表:
这个流动相体系应该挺稳定的，UPLC柱的保留时间重现性很好，如果是普通色谱柱可能保留时间重现性稍微差一些
第一针是刚开始进样走的，7分钟之内都出完了。换了几个梯度试了觉得不太行，还是第一个梯度好，就重新用第一个梯度进了一针，结果峰展宽了3倍，出峰时间也延迟了1倍，后面的几个峰的分离度还变差了，再进了一针也一样。不知道是什么原因？
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2022/12/21 17:23:28 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 xiaolanzi5(xiaolanzi5) 发表:
乙酸铵是不是现配的？乙腈是不是新鲜的？每针进样前初始流动相平衡时压力有没有大的变化？
  第一针是刚开始进样走的，7分钟之内都出完了。换了几个梯度试了觉得不太行，还是第一个梯度好，就重新用第一个梯度进了一针，结果峰展宽了3倍，出峰时间也延迟了1倍，后面的几个峰的分离度还变差了，再进了一针也一样。不知道是什么原因？
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