主题:【分享】【实战宝典】固相萃取有哪些特点?操作步骤有哪些?

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发帖人:JOE HUI

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问题描述:

固相萃取有哪些特点,步骤有哪些?

解答:

固相萃取技术是一种基于色谱理论的样品前处理方法,它采用选择性吸附、选择性洗脱的方式对样品进行富集、分离及纯化。对比传统的液-液萃取,固相萃取具有选择性强、分离时间短、回收率高、不易乳化、有机溶剂用量少及易于自动化等优点。

固定相在固相萃取中起关键作用,固相萃取柱中的固定相与色谱柱固定相除了粒径上的差别外,化学性质基本相似。固相萃取剂除要求对流动相和被富集的化合物呈化学惰性外,还应在保持吸附可逆性的同时具有很高的吸附能力,吸附平衡要快,选择固定相基本上遵循相似相溶的原则。

分析物的极性与固定相极性越相近,保留越好,因此要尽可能选择与目标分析物极性相似的固定相。可应用于固相萃取的固定相填料种类繁多,较常用的有吸附型填料、化学键合型硅胶和聚合树脂类等。

固相萃取柱使用基本步骤:

1.预洗

预洗是用强溶剂预先淋洗小柱,以消除小柱上在生产或储存过程中可能代入的污染物,当在洗脱溶剂的洗脱力强于活化溶剂时一般要实施这一步。如果产品包装密封并明确注明已进行预洗就无需这一步。

2.活化

首先用较强洗脱能力的溶剂润湿吸附剂,而后再以较弱洗脱能力的溶剂润湿小柱,从而保证样品在小柱上有足够的保留。

3.上样

选择强度相对较弱的溶剂溶解样品。液体样品被加到SPE小柱上后,不保留或弱保留的组分随溶剂流出,待测组分和其他强保留组分保留在吸附上。

4.冲洗

用不会把待测组分洗脱出来的溶剂淋洗小柱,随后通常采用抽真空或高速离心来排除残余溶剂。

5.淋洗

用尽量少的较强溶剂将待测组分洗脱出来,而剩余较强的基体组分仍然保留在填料中。对于收集到的淋洗液,可进一步吹干,用适当溶剂定容,也可用于直接进样。
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