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液相色谱（LC）
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主题：【已应助】色谱图分不开怎么办？

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Ins_e020ef66
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发表于：2023/07/20 15:14:45 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
提取溶剂：甲醇：乙腈：水=2:2:1，个人认为提取物应该大部分为极性代谢物。
所用仪器：赛默飞QE
检测条件和TIC图如下：
正离子模式负离子模式
色谱柱：美国Waters公司
BEH C8柱（1.7μm，2.1×100mm）		色谱柱：美国Waters公司
HSS T3柱（1.8μm，2.1×100mm）
柱温：50℃柱温：50℃
进样体积：5μl进样体积：5μl
流速：0.35ml/min流速：0.35ml/min
流动相A相：0.1%甲酸/水流动相A相：0.1%甲酸/水
流动相B相：0.1%甲酸/乙腈流动相B相：0.1%甲酸/乙腈
梯度洗脱程序：
0-1min，5%（B）；
1.1-11min，5%-100%（B）；
11.1-13min，100（B）；
13.1-15min，5%（B）。		梯度洗脱程序：
0-1min，5%（B）；
1.1-11min，5%-100%（B）；
11.1-13min，100（B）；
13.1-15min，5%（B）。


更改流动相梯度如下，其他条件不变

正离子模式负离子模式
  
梯度洗脱程序：
0-1min，5%B；
1-6min，5%-20%B；
6-9min，20%-50%B；
9-13min，50%-95%B；
13-15min，保持95%B。		梯度洗脱程序：
0-1min，5%B；
1-6min，5%-20%B；
6-9min，20%-50%B；
9-13min，50%-95%B；
13-15min，保持95%B。。

得到TIC图如下：

结果感觉没有之前好了，不知道下一步该怎么优化？
推荐答案：歌名回复于2023/07/20
1.，色谱柱多冲洗下，有时间的话高水相高有机相换着来冲洗过夜
2. .色谱柱干哈POS和NEG要换柱子呢？？没必要，也不好看数据，同个样品都用同个柱子跑就行
3.  洗脱梯度拉长到35min、
4.  跑样前更新一下exclusion
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Ins_eedcdc41
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2023/7/20 15:19:55 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
1.，色谱柱多冲洗下，有时间的话高水相高有机相换着来冲洗过夜
2. .色谱柱干哈POS和NEG要换柱子呢？？没必要，也不好看数据，同个样品都用同个柱子跑就行
3.  洗脱梯度拉长到35min、
4.  跑样前更新一下exclusion
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houjjun
houjjun
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2023/7/20 16:47:08 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
洗脱的太快了，尤其是30%-60%这一段，把总时间控制在30以上分钟，30%-60%控制在15-20分钟
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