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液相色谱（LC）

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主题：【已应助】求助用蒸发光散射测多糖成分

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发表于：2022/08/22 18:29:43 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

我在尝试用ELSD测铁皮石斛中多糖成分，在单标进样时，发现有几个单个对照品走液相时出来的峰不是单个峰，如下图，想向大家求助一下，这是什么原因，该怎么解决，

推荐答案：安平回复于2022/08/29

氨基柱，使用75%左右的乙腈水做流动相是常见的方法，柱温45度左右可以试试。

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2022/8/23 10:41:23 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

有的样品是会出两个峰，原因有时有很多。
但最可能的原因就是异构体导致的。
一般来说在液相分离时，非手性柱在分离样品时不会出现同一化学结构的物质分两个峰。
但是有些物质的对映异构体之间会有很大的性质差异，就导致了在色谱柱中产生了分离。
曾经做过一个杂质，在限度范围内是正常的峰，但是达到一定高的浓度后（在做峰定位时发现的）就会分叉成双峰，这两个峰峰纯度都很高，专属性很强，但是造成这个现象的原因还是没法具体处理，好在不影响正常检测。
至于情况，建议换一根柱子或者改善一下色谱条件试一试，说该峰与溶剂峰重合，是不是出峰有些太早了。
即使不是双峰，该色谱条件也有待改善。

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2022/8/23 17:54:03 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 wuyuzegang(dahua1981) 发表:
有的样品是会出两个峰，原因有时有很多。
但最可能的原因就是异构体导致的。
一般来说在液相分离时，非手性柱在分离样品时不会出现同一化学结构的物质分两个峰。
但是有些物质的对映异构体之间会有很大的性质差异，就导致了在色谱柱中产生了分离。
曾经做过一个杂质，在限度范围内是正常的峰，但是达到一定高的浓度后（在做峰定位时发现的）就会分叉成双峰，这两个峰峰纯度都很高，专属性很强，但是造成这个现象的原因还是没法具体处理，好在不影响正常检测。
至于情况，建议换一根柱子或者改善一下色谱条件试一试，说该峰与溶剂峰重合，是不是出峰有些太早了。
即使不是双峰，该色谱条件也有待改善。

谢谢。我之前用的是酰胺柱，然后我今天试着换了氨基柱，但是出现了基线不平的情况，基线一直不平，我就一直无法进样